제품설명
본 효소는 단일 가닥, 이중 가닥 DNA 그리고 DNA와 RNA의 hybrid를 무작위로 분해하여 5’-phosphate 말단을 가지는 oligonucleotide를 생성하는 endodeoxyribonuclease이다. Mg2+ 존재 하에서는 이중 가닥 DNA에 무작위로 nick을 만들지만, Mn2+ 존재 하에서는 이중 가닥을 동시에 절단하여 DNA를 단편화한다.
본 효소는 활성에는 영향이 없을 수준까지 protease 및 RNase 활성을 제거하여 중성 pH에서 안정성이 향상되어 RNA 조제시 안전하게 이용할 수 있다.
보존 -20℃
농도 5 U/㎕
형상

20 mM

 

Tris-HCl (pH7.5, 4℃)

50 mM

 

NaCl

0.1 mM

 

CaCl2

50%

 

Glycerol
기원
Expressed in non-animal host carrying plasmid encodes the gene of bovine pancreas DNase I.
첨부 buffer 조성 (10x)

400 mM

 

Tris-HCl, pH7.5

80 mM

 

MgCl2

50 mM

 

DTT
활성의 정의
25℃, pH5.0에서 송아지 흉선 DNA를 기질로 1분에 OD260를 0.001 증가시키는 효소 활성을 1 U으로 한다. (Kunitz unit)
활성 측정용 반응액 조성

100 mM

 

Sodium acetate (pH5.0, 25 ℃)

5 mM

 

MgSO4

40 ㎍ / ㎖

 

송아지 흉선 DNA

용도
- T7 또는 SP6 Polymerase를 이용한 in vitro transcription 후 RNA 샘플에서 버퍼 교환 없이 주형 DNA를 제거한다.
- DNA Polymerase I (Code 2130)과 같이 사용해서 nick translation에 사용한다.
- Mn2+가 존재할 때 shot-gun sequencing을 위한 DNA library 제작에 사용한다.
- DNA와 단백질의 상호작용을 분석하기 위한 foot-printing analysis에 사용한다.
- RT-PCR 전 gDNA제거에 사용한다.
일반적 성질
- 분자량: 약 39,000
- 최적 pH: pH7.0~pH8.0 (2가 양이온이 존재할 때 최대 활성을 보인다.)
- 저해제: EDTA
- 안정성: 75℃, 10분의 열처리에서 비가역적으로 불활성화된다.