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특이성 높은 high-plex PCR에 최적

Multiplex PCR Kit Ver.2

-

제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)		 비고 사용자매뉴얼
Takara
 RR062A
 Multiplex PCR Assay Kit Ver.2
관련학술 구매하기 		100 회
 284,000원  RR062A.e.v1510Da.pdf
Takara
 RR062B
 Multiplex PCR Assay Kit Ver.2
관련학술 구매하기 		400 회 (RR062A x 4)
 1,020,000원 

  • 특화된 악세서리 단백질로 반응 특이성을 향상, 비특이적 band를 억제
  • 타사 제품보다 짧은 반응 시간
  • Bias 적은 PCR 증폭 실현
  • Hot start PCR로 smear 현상 억제
제품설명
Multiplex PCR은 여러 primer set를 동시에 하나의 PCR 반응에 사용하는 실험기법으로 복수의 유전자 영역을 동시에 증폭하는 방법이다. Multiplex PCR을 진행하면 시약과 소모품을 절약할 수 있고 동시 여러 유전자를 신속하게 검출 할 수 있고 귀중한 샘플을 효율적으로 이용할 수 있는 장점이 있다.
본 제품은 고속 PCR용 효소와 primer annealing 특이성을 극도로 높인 buffer의 조합으로 기존의 multiplex 효소에 비해 단시간에 특이적 서열에 의한 증폭 편중 (bias) 현상이 적은 PCR증폭을 실현한다.
또한 효소 양과 반응 시간을 조정함으로써 200 primer set의 multiplex PCR도 가능하다. Multiplex PCR 이외에도 extra band나 smear 현상으로 목적 단편을 증폭하기 어려운 primer set을 이용한 single PCR에도 본 제품을 사용하면 extra band나 smear를 줄이고 목적의 단편을 보다 단시간에 특이적으로 증폭할 수 있다.
내용 (50 ㎕ 반응 계, 100회)

2×Multiplex PCR Buffer (Mg2+, dNTP plus)*

1.25 ㎖ x 2

Multiplex PCR Enzyme Mix

25 ㎕
* 반응에 필요한 buffer, dNTP Mixture가 포함되어 있음 (Mg2+ 농도는 최종 농도 2 mM).
보존 -20 ℃
실험 예 - 10종류의 프라이머를 이용한 Multiplex PCR

1. 실험결과
Multiplex PCR Assay Kit Ver.2를 이용하였을 때, 타겟 유전자 10종에 대해 타사 동일한 타입의 제품보다 비특이적인 증폭없이 보다 짧은 시간에 결과를 얻을 수 있었다.


A:

Primer set 1 (122 bp~1,068 bp)

M:

100 bp DNA Ladder

B:

Primer set 2 (155 bp~1,967 bp)

1:

Multiplex PCR Assay Kit Ver.2

 

 

2:

A사 동일 타입의 제품

 

 

3:

A사 동일 타입의 제품

 

 

◀:

비특이 증폭 산물


2. PCR 조건
 

Multiplex PCR Assay Kit Ver.2

A사 동일 타입의 제품

B사 동일 타입의 제품

Preheat

94℃ 1 min.

95℃ 3 min.

95℃ 15 min.

PCR
(30 cycles)

94℃
57℃
72℃

30 sec.
30 sec.
30 sec.(set 1)
60 sec.(set 2)

95℃
60℃
72℃

15 sec.
30 sec.
60 sec.(set 1)
120 sec.(set 2)

95℃
60℃
72℃

30 sec.
90 sec.
90 sec.(set 1)
120 sec.(set 2)

Final extension

72℃ 10 min.

72℃ 10 min.

72℃ 10 min.

Total time

100 min.(set 1)
115 min.(set 2)

110 min.(set 1)
140 min.(set 2)

158 min.(set 1)
188 min.(set 2)
※ PCR 기기: Thermal Cycler Dice® Gradient (Code TP600) 사용

Keyword : high plex PCR,멀티플렉스PCR,고속PCR,fast PCR
특수 PCR (Epigenetics, UNG 등)
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Bisulfite 처리 후의 DNA PCR 증폭에 최적
EpiTaq HS (for bisulfite-treated DNA)
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특이성 높은 high-plex PCR에 최적
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