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Home > 전제품보기 > Cloning 관련 > In-Fusion Cloning > [FAQ] In-Fusion® Cloning

[FAQ] In-Fusion® Cloning

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General information
In-Fusion® Cloning은 무엇인가요?
In-Fusion® Cloning의 효율은 어떻게 되나요?
In-Fusion® Cloning은 어떤 원리를 이용하나요?
In-Fusion® Snap Assembly와 In-Fusion® Snap Assembly EcoDry는 어떤 차이점을 보이나요?
Cloning Enhancer (CE)는 무엇인가요?
In-Fusion® Cloning 방식은 sequence error를 유발하나요?
In-Fusion® Cloning master mix는 얼마나 안정적인가요?


In-Fusion® Snap Assembly
In-Fusion® HD Cloning과 In-Fusion® Snap Assembly의 차이는 무엇인가요?
In-Fusion® HD Cloning과 In-Fusion® Snap Assembly은 서로 다른 PCR polymerase를 추천하고 있는데, 이로 인한 성능 차이가 있나요?
NEBuilder HiFi DNA Assembly와 In-Fusion® Snap Assembly는 어떤 차이점이 있나요?


Inserts and primer design
성공적인 In-Fusion® Cloning 반응을 위해서 필요한 상동 서열 조건은 무엇인가요?
선형화 된 vector와 cloning insert간의 상동 서열은 어떻게 부가할 수 있나요?
상동 서열을 부가하기 위한 PCR primer는 어떻게 디자인하나요?
In-Fusion® Cloning용 PCR primer 디자인을 위한 온라인 툴이 지원되나요?
In-Fusion® Cloning 반응에서는 왜 상동 서열이 중요한가요?
5’ 혹은 3’ overhang으로 선형화 된 vector의 상동 서열은 어떻게 확인하나요?
In-Fusion® Cloning을 수행할 때 reading frame은 어떻게 조절할 수 있나요?
원하는 insert를 cloning vector에 있는 tag (예 - 형광단백질, Myc, HA 등)와 동일한 translational reading frame을 갖도록 cloning하려면 어떻게 해야 하나요?
In-Fusion® PCR primer에 small external sequence가 포함될 수 있나요?
In-Fusion® Cloning을 위해서 15 bp 상동 서열이 vector 내에 추가로 존재하는 것이 문제가 될까요? 이로 인해 여러 종류의 최종 산물이 형성되나요?
In-Fusion® Cloning을 위해 인산화 된 PCR primer를 사용해야 하나요?
In-Fusion® PCR primer로 사용되는 oligonucleotide는 어떤 조건이 필요한가요?
Insert 증폭 시 추천하는 PCR polymerase는 무엇인가요?
PCR로 생성된 3’ A-overhang 산물이 In-Fusion® Cloning 반응에 영향을 주나요?
한 번의 In-Fusion® 반응으로 multiple fragment를 하나의 vector에 cloning 할수 있나요?
Insert와 vector 혹은 인접한 insert와의 상동 서열 15 bp를 분리해서 부가해도 되나요?
In-Fusion® Cloning 반응을 수행하기 전 PCR 증폭된 insert와 vector는 정제되어야 하나요?
In-Fusion® Cloning과 호환 가능한 DNA fragment의 최대 크기는 얼마나 되나요?
In-Fusion® Cloning과 호환 가능한 DNA fragment의 최소 크기는 얼마나 되나요?


Vectors
In-Fusion® Cloning과 호환 가능한 vector는 무엇인가요?
In-Fusion® Cloning은 vector를 선형화 하는데 사용한 제한효소 자리를 보존할 수 있나요?
In-Fusion® Cloning을 위해 선형화 한 vector의 말단을 탈인산화 해야 하나요?
큰 크기의 vector도 In-Fusion® Cloning에 적용할 수 있나요?
반복되는 서열을 가지는 vector도 In-Fusion® Cloning에 적용할 수 있나요?


Applications
In-Fusion® Cloning을 이용해 선형화 된 DNA를 공유 결합 하도록 할 수 있나요?
In-Fusion® Cloning 반응 시, circular 형태의 vector를 사용할 수 있나요?
상동 서열이 선형화 된 vector의 말단에서 멀리 떨어져 있는 경우, In-Fusion® Cloning을 적용할 수 있나요?
Mutagenesis를 위해 In-Fusion® Cloning을 이용할 수 있나요?
Oligonucleotide 혹은 shRNA oligonucleotide의 cloning 시 In-Fusion®을 이용할 수 있나요?
In-Fusion® Cloning에 GC-rich DNA 서열을 이용할 수 있나요?


Tips
In-Fusion® Cloning 시 추천하는 molar ratio는 어떻게 되나요?
상동 서열의 길이를 변경해도 되나요? 더 긴 길이의 상동 서열을 이용하면 In-Fusion® 반응 효율을 높일 수 있나요?
In-Fusion® 반응 효율을 높이기 위해 반응 시간을 늘려도 되나요?
어떤 bacteria strain이 In-Fusion® Cloning에 호환되나요?
사용자 매뉴얼에서 안내하는 것 보다 많은 용량의 In-Fusion® Cloning 반응 산물을transformation하는 것이 가능한가요?
In-Fusion® Cloning 반응에서 negative control로 확인되는 colony는 어느 정도가 되나요?
In-Fusion® Cloning 반응 산물을 electroporation 할 수 있나요?
Transformation 효율과 전체의 cloning 효율을 어떻게 확인할 수 있나요?