[PrimeSTAR 는]
다카라가 독자적으로 개발한 매우 높은 정확성과 뛰어난 증폭효율을 겸비한 PCR 효소입니다.
매우 강력한 3' → 5' exonuclease 활성을 가져, PCR 증폭에 대해 강력한 교정기능 (Proofreading 기능)을 나타내는 한편,
Taq DNA Polymerase 만큼 매우 뛰어난 증폭 효율도 나타냅니다.
상온에서의 DNA polymerase 활성 및 3' → 5' exonuclease 활성을 억제하기 위한 monoclonal antibody를 포함하고 있어 PCR 반응전의 mispriming 이나 primer digestion을 막고 높은 반응특이성을 얻을 수 있습니다.
[정확한 PCR, Cloning을 위한 최상의 라인업] - PrimeSTAR
® DNA Polymerase 시리즈별 특징은 아래와 같습니다.
|
정확도 |
GC or AT rich
서열의 증폭 |
주형량
적용범위 |
신장속도 |
증폭길이
(human gDNA기준) |
PCR 산물 말단형상 |
Hot Start |
PrimeSTAR® GXL |
★★★★ |
★★★★★ |
★★★★★ |
★★★★(★) * |
30 kb
|
Blunt end |
Anti-Taq antibody로 별도의 activation 과정없이 hot start PCR 가능 |
PrimeSTAR® Max |
★★★★★ |
★★★ |
★★★(★)** |
★★★★★ |
6 kb
|
PrimeSTAR® HS |
★★★★★ |
★★★ |
★★ |
★★ |
8.5 kb
|
* 효소 2배 사용시 10초/kb 고속 PCR 가능
** 신장시간 1분/kb 설정시 가능
[PrimeSTAR 시리즈 별 제품보기] - 시리즈 별로 효소 단품, premix 등 다양한 형태의 제품을 선택할 수 있습니다.
|
Code |
제품명 |
용량 |
PrimeSTAR® GXL |
R050A |
PrimeSTAR® GXL DNA Polymerase |
250 U |
R051A |
PrimeSTAR® GXL Premix |
200 회* |
R052A |
PrimeSTAR® GXL Premix Fast, Dye plus |
200 회* |
PrimeSTAR® Max |
R047A |
PrimeSTAR® Max DNA Polymerase Ver.2 |
100 회* |
R045A |
PrimeSTAR® Max DNA Polymerase |
100 회* |
PrimeSTAR® HS |
R010A |
PrimeSTAR® HS DNA Polymerase |
250 U |
R040A |
PrimeSTAR® HS (Premix) |
100 회* |
R044A |
PrimeSTAR® HS DNA Polymerase with GC Buffer |
250 U |
*50 ㎕ PCR 반응 시
[PrimeSTAR 선택가이드]
PrimeSTAR® Max DNA Polymerase 특징보기
※ PrimeSTAR
® Max DNA Polymerase (Code R045A)는
PrimeSTAR® Max DNA Polymerase Ver.2 (Code R047A)로 업그레이드 되었습니다. (최고 수준의 정확성은 유지, 고속 PCR 성능 대폭 향상)
1. 정확성
GC rich인
Thermus thermophilus HB8 genomic DNA을 주형으로 임의로 선택한 8영역 (증폭 사이즈는 각각 약 500 bp)을 PCR 증폭한 후, 벡터에 cloning 하여
각 증폭산물마다 다수의 clone을 선별하여 sequencing을 진행하였다. 그 결과 PrimeSTAR
® Max DNA Polymerase는 총 230,129 염기 중 단 9개의 염기에서만
mutation이 나타남을 확인하였다. 이는
Taq DNA Polymerase과 비교해서 약 10배 높은 정확도이며, PrimeSTAR
® HS DNA Polymerase와 A사 High Fidelity 효소에 비해서도
동등 이상의 정확성을 보였다.
[각 효소의 정확도 비교]
2. 증폭속도
1)
λ DNA을 주형으로 annealing 시간 5초, extension 시간 10초 혹은 30초로 각 사이즈를 증폭하였다.
Template |
λ DNA 1 ng/50㎕ 반응계 |
Thermal cycler |
TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice® |
PCR 조건 |
98℃
55℃
72℃ |
10 sec.
5 sec.
10 or 30 sec. |
30 cycles |
[신장 시간 10초] |
[신장 시간 30초] |

|
 M: λ-Hind III digest |
Extension 시간 10초 설정시 6 kbp, 30초 설정시 8 kb까지 양호한 증폭을 볼 수 있고,
λ DNA을 주형으로 PCR 하는 경우 extension 시간 5 sec./kb의
설정이 가능한 것을 확인하였다.
2) Human genomic DNA를 주형으로 annealing 시간 5초, extension 시간 10초 혹은 30초로 각 사이즈를 증폭하였다.
Template |
Human gDNA 100 ng/50㎕ 반응계 |
Thermal cycler |
TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice® |
PCR 조건 |
98℃
55℃
72℃ |
10 sec.
5 sec.
10 or 30 sec. |
30 cycles |
[신장 시간 10초] |
[신장 시간 30초] |

|
 M: λ-Hind III digest |
Extension 시간 10초 설정시 4 kb, 30초 설정시 6 kb까지 양호한 증폭을 볼 수 있고, human gDNA를 주형으로 PCR 하는 경우에도 extension 시간 5 sec./kb의
설정이 가능한 것을 확인하였다.
3) cDNA를 주형으로 annealing 시간 5초, extension 시간 10초 혹은 30초로 각 사이즈를 증폭하였다.
Template |
cDNA (Total RNA 200 ng)/50㎕ 반응계 |
Thermal cycler |
TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice® |
PCR 조건 |
98℃
55℃
72℃ |
10 sec.
15 sec.
10 or 30 sec. |
30 cycles |
[신장 시간 10초] |
[신장 시간 30초] |

M: λ-Hind III digest |
Extension 시간 10초 설정시 2 kb, 30초 설정시 4 kb까지 양호한 증폭을 볼 수 있고, cDNA를 주형으로 PCR 하는 경우에도 extension 시간 5~10 sec/kb의 설정이 필요한 것을 확인하였다.
PrimeSTAR® GXL DNA Polymerase 특징보기
1. 신장성
뛰어난 신장성을 가진 PrimeSTAR
® GXL은 기존의 High Fidelity PCR효소가 증폭하지 못한 긴 타겟도 증폭할 수 있다.
Human genomic DNA를 주형으로 30 kb,
λ DNA를 주형으로 40 kb, cDNA에서는 13.5 kb까지 증폭되는 것을 확인하였다.
1. |
p53 |
0.5 kb |
2. |
DCLRE 1A |
1 kb |
3. |
DCLRE 1A |
2 kb |
4. |
DCLRE 1A |
4 kb |
5. |
β-globin |
8.5 kb |
6. |
β-globin |
15 kb |
7. |
β-globin |
20 kb |
8. |
β-globin |
24 kb |
9. |
β-globin |
27 kb |
10. |
β-globin |
30 kb |
M. |
λ-Hind III digest |
1. |
0.5 kb |
2. |
1 kb |
3. |
2 kb |
4. |
4 kb |
5. |
8 kb |
6. |
15 kb |
7. |
20 kb |
8. |
30 kb |
9. |
40 kb |
M. |
λ-Hind III digest |
1. |
Dystrophin |
1 kb |
2. |
Dystrophin |
2 kb |
3. |
CCND2 |
2.8 kb |
4. |
TFR |
4 kb |
5. |
Dystrophin |
6 kb |
6. |
Dystrophin |
8 kb |
7. |
Dystrophin |
12 kb |
8. |
Dystrophin |
13.5 kb |
M. |
λ-Hind III digest |
2. 높은 감도와 넓은 주형 허용량
일반적으로 정확성이 높은 high fidelity PCR 효소는 반응액에 포함된 template 양에 영향을 받기 쉽고, cDNA의 증폭이 까다로운 경우가 있다. 하지만 PrimeSTAR
®
GXL은 template 양에 대한 허용 범위가 넓고 cDNA를 주형으로 한 증폭도 효율적으로 진행할 수 있다.
다양한 양의 human genomic DNA를 주형으로 PrimeSTAR GXL
® 과 타사 High Fidelity PCR 효소 및 r
Taq 의 증폭 효율을 비교하였다.

주형: human genomic DNA
타겟: DCLRE 1A 유전자 (2 kb)
Template 양 /50 ㎕ 반응계 |
1. |
No template |
2. |
100 pg |
3. |
1 ng |
4. |
10 ng |
5. |
100 ng |
6. |
200 ng |
7. |
500 ng |
M. |
λ-Hind III digest |
PrimeSTAR
® GXL은 타사 High Fidelity PCR효소나 r
Taq보다 민감하고 양호한 증폭성을 보였다. 또, 타사 High Fidelity PCR 효소는 많은 양의 template이 포함된 조건에서
증폭 억제반응이 나타났지만, PrimeSTAR GXL
®는 template 양에 관계없이 높은 반응성을 나타내었다.
3. GC rich 타겟의 증폭
비특이적 증폭이 일어나기 쉬운 GC rich template에서도 특별한 버퍼의 사용이나 반응 조건을 변경하지 않아도 특이성이 높은 증폭이 가능하다.
(자사 비교 데이터)
주형 |
타겟 유전자 |
Human genomic DNA
(100 ng/50 ㎕ 반응계) |
1: APOE gene 746 bp (GC함량 74%) |
2: TGFβ 1 gene 2,005 bp (GC함량 69%) |
T. thermophilus HB8 genomic DNA
(10 ng/50 ㎕ 반응계) |
3: 2,029 bp (GC함량 74%) |
4: 4,988 bp (GC함량 74%) |
M: pHY Marker |
B사 효소 2: GC rich 용 효소 |
D사 효소: GC buffer 사용 |