August 6, 2018

Are you having difficulty with gene transfer into cells that resist transfection and transduction?

조혈모세포 및 기타 suspension cell을 이용한 경우, 세포의 특징으로 인해 유전자 전달 (transfection 및 transduction) 효율이 낮아 연구가 제한되기도 한다. RetroNectin^® (Code T100A) 시약은 세포와 바이러스 입자의 물리적인 거리를 좁혀줌으로써 형질도입 효율을 획기적으로 향상시켜주므로 이러한 제한을 극복하는 데 도움이 될 것이다.
이는 integrin receptor VLA-4 와/또는 VLA-5를 발현하는 세포로 바이러스를 이용한 유전자 전달을 향상시킨다.
VLA-4 발현 세포는 T 세포, B 세포, 단핵구 (monocytes), NK 세포, 호산구 (eosinophils), 골수 단핵구 세포 (bone marrow monocytic cells) 및 림프구 전구 세포 (lymphoid progenitors)가 포함되며, 흉선세포 (Thymocytes), 활성화된 T 세포 (activated T-cells) 및 비만세포 (mast cells)는 VLA-5를 발현한다.


Don't just take our word for it. (요 문구는 번역에서 생략함)
전 세계 과학자들은 retrovirus/lentivirus 유전자 전달을 위해 RetroNectin^® 시약을 사용한다. 이는 adoptive cell therapy (T-cell immunotherapy)와 같은 임상 응용 분야에서 큰 가능성을 가지고 있고, 특히 RetroNectin^® GMP grade 제품은 60개 이상의 임상시험에 사용되었다.

How much does RetroNectin^® reagent alone increase transduction efficiency?
바이러스 상등액 감염 방법 (세포와 바이러스를 혼합한 후 RetroNectin^® coated plate에 로딩) 을 사용할 경우 RetroNectin^® 시약은 인간 CD34⁺ 세포의 경우 50~70%, 마우스 골수 단핵 세포의 경우 20~30% 정도 형질도입 효율을 증가시킨다.

To support a high viral transduction efficiency, follow these best practices:
1. 높은 역가 (>10⁶ CFU/㎖)로 retrovirus/lentivirus 상등액을 준비한다.
2. 바이러스 입자를 RetroNectin^® 시약 코팅 플레이트에 200~250 ㎕/cm으로 먼저 넣어주고, 최상의 결과를 얻기 위해 32°C에서 4~5시간 동안 배양 (incubation) 한다.
3. 상등액을 버리고 PBS로 세척한 후 바이러스가 포함된 플레이트가 마르지 않도록 주의하며 상등액을 제거한 후 즉시 타겟 세포를 플레이트에 첨가한다. 플레이트가 마르면 유전자 전달효율이 현저하게 저하된다.

RetroNectin^® 시약 및 임상 시험에서의 사용에 대해 더 궁금하다면 당사의 RetroNectin Learning Center에서 내용을 확인할 수 있습니다.

* RetroConectin^® GMP grade (Code T202)은 GMP (Good Manufacturing Practice) 지침에 따라 품질 보증 제품으로 제조됩니다.