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대장균 단백질 발현 ＆ 정제 Starter Kit

제조사	제품코드	제품명	용량	가격 (부가세별도)	사용자매뉴얼
Clontech	631428	pET Express & Purify Kit-His60 (In-Fusion® Ready)	20회 (Package)	1,855,000원	,
Clontech	631429	pET Express & Purify Kit-HisTALON (In-Fusion® Ready)	20회 (Package)	1,814,000원	, , ,
Clontech	631430	pET Express & Purify Kit-HisTALON	20회	1,711,000원	, , ,
Clontech	631431	pET Express & Purify Kit-His60	20회 (Package)	1,751,000원	,

Product index

Overview
His-tag 융합 단백질 정제
단백질 추출 · 정제관련
항체 정제
- 항체 정제 Resin
- Capturem™ IP ＆ Co-IP..
곤충 세포 단백질 발현 (Bac..
포유류 세포 단백질 발현
대장균 단백질 발현
Brevibacillus／Bacillus 발..
다양한 tag 단백질 관련
당／인산화 단백질 관련
단백질 염색 시약
단백질 검출, 정량, 해석
Protease (아미노산 서열 해..

His-tagged protein의 최적화된 발현과 정제
같은 kit 안에 제공되는 N-말단과 C- 말단 6 x HN-tagged vector
T7 lac promoter를 통해 유도 가능한 pET 기반의 단백질 발현 시스템
Cloning 방법, 정제용 resin 종류와 resin 형태를 선택 가능
CEP kit를 사용한 쉽고, 고효율의 재현성있는 cloning

Bacterial Expression & Purification Starter Kit는 cloning 형태를 선택할 수 있도록 제공되며 N-말단이나 C-말단 6 x HN fusion tag을 encoding하는 pET 기반 vector (1)를 사용하여 histidine 표지 단백질을 고발현시킬 수 있다.
목적 유전자는 pEcoli expression vector로 cloning하여 N-말단이나 C-말단에 6 x HN tag된 구조를 만들수 있다.

Cloning 방법 선택

EP (Express & Purify) Starter Kit는 제한효소를 사용하는 일반적인 cloning용 circular vector를 포함하는 pEcoli Expression System으로 구성되어 있다. Vector에는 MSC site가 있어 원하는 서열에 맞춰 cloning할 수 있다.
CEP (Clone, Express & Purify) Starter Kit는 cloning을 위해 linearized vector와 In-Fusion 효소를 제공하는 pEcoli Expression System을 포함한다. 이 시스템은 Clontech의 In-Fusion cloning 기술을 사용하여 쉽고, 확실하게 PCR directional cloning을 진행할 수 있다 (2). 생물학적 활성을 유지시키기 위해 목적 유전자에 염기를 추가하지 않아도 되는 큰 장점이 있다.

정제 resin 선택

E. coli 에 형질전환과 선별과정 후, 발현된 N-말단이나 C-말단 표지 단백질은 immobilized metal affinity chromatography (IMAC) resin과 buffer를 선택하여 효과적으로 정제한다. 가장 좋은 결합력을 위해 His60 Ni Superflow Resin이나 가장 좋은 정제 순도를 위해선 HisTALON Resin을 선택할 수 있다. 모든 EP와 CEP Starter Kit는 단백질 추출과 정제를 위해 필요한 buffer나 resin의 종류, resin의 형태에 따라 제품을 선택할 수 있다.

Figure 1. Excellent purity is obtained when using HisTALON Cartridges for purification. The CEP Starter Kit was used to generate BL21 E. coli expressing N-terminal 6xHN-tagged AcGFP1, as seen in Panels A & B; and C-terminal 6xHN-tagged AcGFP1, as seen in Panels C & D.

Figure 2. Use His60 Ni Superflow for the highest binding capacity.The CEP His60 Ni Superflow Starter Kit was used to generate and purify 6xHNAcGFP1. Lane M: Molecular weight marker. Lane OS: Clarified lysate with expressed 6xHN-AcGFP1. Lane FT: Nonadsorbed material. Lanes W1 and W2: Wash. Lane E1-E4: Eluted 6xHN-AcGFP1 fractions.

Components & Storage Conditions

각 제품 구성물과 보관조건은 Certificate of Analysis 를 참조하십시오.

References

1. Moffatt, B.A. and Studier, F.W. (1986) J. Mol.Biol. 189(1):113-130.
2. In-Fusion PCR Universal Cloning Kits (2005) Clontechniques XX(2):16-17.

대체품 안내

종매품	대체품
EP His60 Ni Gravity Column Starter Kit (Code 631416)	pET Express & Purify Kit-HisTALON (Code 631430)
EP HisTALON Gravity Column Starter Kit (Code 631319)	pET Express & Purify Kit-His60(Code 631431)
CEP HisTALON Gravity Column Starter Kit (Code 631423)	pET Express & Purify Kit-His60 (In-Fusion Ready) (Code 631428)
CEP His60 Ni Gravity Column Starter Kit (Code 631422)	pET Express & Purify Kit-HisTALON (In-Fusion Ready)(Code 631429)

Keyword : 631416,631433,635657,635665, 631419, 631423, 631422

대장균 단백질 발현

[Overview] Bacterial Expression System

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Soluble tag (TF tag) 이 포함된 Cold shock Ve..

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