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빠르게 소용량의 his-tagged protein 정제

TALON Magnetic Beads

-

제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)		 비고 사용자매뉴얼
Clontech
 635636
 TALON Magnetic Beads
관련학술 구매하기 		1 ml×2
 371,000원  제조사 페이지로 바로가기 x33125
Clontech
 635637
 TALON Magnetic Beads
관련학술 구매하기 		1 ml×6
 1,029,000원  제조사 페이지로 바로가기
Clontech
 635638
 TALON Magnetic Beads Buffer Kit
관련학술 구매하기 		1 Kit
 538,000원  제조사 페이지로 바로가기 x33125
Clontech
 631964
 Magnetic Stand
관련학술 구매하기 		1 Set
 114,000원  제조사 페이지로 바로가기

  • His-tagged protein의 신속하고 간편한 정제
  • TALON®의 높은 친화성과 특이성으로 목적 단백질의 순도 향상
  • 적은 부피 (50-200 ㎕)에서 elution
제품 설명
TALON® Magnetic Bead는 his-tagged protein에 높은 친화성과 특이성을 가진 TALON® resin과 간편히 분리할 수 있는 magnetic beads의 장점을 결합한 제품이다. Magnetic beads는 cobalt 이온과 결합되어 있어 his-tagged protein에 보다 더 높은 특이성을 가지며, cobalt 이온은 TALON®의 tetradentate metal chelator에 의해 beads와 결합되어 있어, 정제 중에 금속이온이 탈락하는 것을 막는다.

고도의 특이적 결합 & 추출
아래의 그림과 같이 TALON® Magnetic Bead는 높은 특이성으로 작은 분자량에서 큰 분자량까지 다양한 크기의 his-tagged protein과 결합하며, 정제된 단백질은 소용량 (50-200㎕)으로 elution되므로 농축된 형태로 정제할 수 있다 (~3 ㎎/㎖). TALON® Magnetic Bead는 5% 현탁액으로 제공되며, ㎖ 당 750 ㎍의 단백질과 결합할 수 있다.


그림. TALON® Magnetic Beads를 이용한 his-tagged protein 정제
E. coli BL21에서 발현된 단백질을 xTractor™ Buffer (Code 635623)로 추출하여 TALON® Magnetic Beads로 정제한 결과 고순도로 단백질이 정제할 수 있었다 (Lane 1: Starting E. coli extract. Lane 2: Nonadsorbed material. Lane 3: Eluted protein. Lane M: Molecular weight markers.).
TALON® resin의 특징
TALON resin
TALON® resin은 cobalt를 이용해 his-tagged protein을 정제하는 immobilized metal affinity chromatography (IMAC) resin이다. Cobalt는 nickel보다 his-tagged protein에 대해 높은 특이성을 나타내므로 his-tagged protein을 고순도로 정제할 수 있다.
Cobalt를 포함한 결합 부위
TALON® Metal Affinity Resin은 결합 부위에 cobalt 이온을 포함하고 있어, his-tagged protein에 대해 매우 높은 특이성을 가지고 있다. Cobalt 이온을 포함한 TALON® 결합부위는 histidine의 위치에 매우 까다로워 histidine이 공간적으로 연속해 있거나, 가까이 위치한 (6x HN tag, HAT tag 등) 단백질만 resin에 결합할 수 있다. 반면 nickel 기반의 resin (Ni-NTA resin 등)은 이러한 특이적인 서열이 아닌 histidine이 불규칙하게 배치된 서열에도 결합하므로, 상대적으로 cobalt 기반의 TALON® resin이 nickel에 비해 his-tagged protein을 특이성 높게 정제할 수 있다.
금속이온 탈락이 적은 균일한 matrix 구조
Cobalt resin은 nickel resin에 비해 더 균일한 구조를 가진다. TALON® resin은 3차 포켓구조를 형성하며 각각 3개의 carboxyl 그룹과 하나의 질소원자가 cobalt 양이온과 결합한 구조로, 이러한 구조는 cobalt 이온이 2개의 인접한 histidine 잔기와 결합되도록 한다. 따라서 cobalt 이온이 매우 단단하게 결합되어 있어 resin에서 누출되지 않는다. 반면 nickel resin은 nickel 이온이 TALON® ligand와 유사한 3차 포켓구조나 평면구조, 즉 2개의 다른 배위구조를 형성할 수 있어 TALON®에 비해 구조가 덜 균일하다. 평면 구조에서 nickel 이온은 2개의 carboxyl 그룹과 하나의 질소원자에 결합하고 있어 TALON®에 비해 결합이 약하고 nickel 이온을 강하게 유지할 수 없어 resin에서의 누출이 일어난다. 균일한 matrix를 형성하는 TALON® Metal Affinity Resin은 여러 정제 조건 하에서 높은 결합능력을 가지므로 확실하게 his-tagged protein을 정제할 수 있다.


그림. TALON® Magnetic Beads & Magnetic Stand
보존 4℃
Components & Storage Conditions
각 제품 구성물과 보관조건은 Certificate of Analysis 를 참조하십시오.
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Keyword :
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