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Home > 전제품보기 > cDNA 합성 > Reverse Transcription (Clontech) > SMARTScribe Reverse Transcriptase

SMARTScribe Reverse Transcriptase

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Clontech
639536
SMARTScribe Reverse Transcriptase
관련학술 구매하기 샘플신청 
40 rxns
147,200원 
184,000원
가격할인
05.02 ~ 06.28
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x33065
Clontech
639537
SMARTScribe Reverse Transcriptase
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100 rxns
318,400원 
398,000원
가격할인
05.02 ~ 06.28
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Clontech
639538
SMARTScribe Reverse Transcriptase
관련학술 구매하기
400 rxns
1,142,400원 
1,428,000원
가격할인
05.02 ~ 06.28
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  • 최대 14.7 kb의 full-length cDNA 합성
  • 적은 양의 샘플 적용 가능
  • 주형 RNA의 cmoplexity 유지
  • 전사체의 5’ end 분석 가능
제품설명
SMARTScribe™ Reverse Transcriptase 은 편향성(bias)이 없이 cDNA를 합성하는 고성능 효소로, 모든 RNA 전사체에서 증폭 및 라이브러리 구축이 가능하다. SMARTScribe™ RTase는 주형 RNA 샘플의 비율을 보존하면서, 긴 전사물에서 full-length cDNA (14.7 kb 까지)를 합성하는 개선된 Moloney Murine Leukemia Virus reverse transcriptase (MMLV RTase)이다. 당사만의 정제 공정과 엄격한 품질 관리 기준을 통해 SMARTScribe™ RTase에 오염을 일으킬 수 있는 nucleases를 모두 제거하였음을 확인하였다.

본 효소는 다양한 응용 분야에 적용 가능해 당사의 SMART® technology를 기반으로 하는 NGS 제품과 함께 사용되도록 특별 제작되었다.

그림 1. SMARTScribe™ RTase의 뛰어난 감도.
SMARTScribe™ RTase 및 합성 RNA를 사용하여 RT-PCR을 진행하였다. 합성 RNA를 10배씩 serial dilution하여 샘플 당 105 - 10 개 copies를 얻었다. 그런 다음 희석한 주형을 HeLa 세포의 Total RNA 50 ng에 첨가하여 복잡성을 증가시켰다. 이렇게 준비한 샘플과 SMARTScribe™ RTase로 합성한 first-strand cDNA를 Advantage® 2 DNA Polymerase Mix와 특이적인 primer를 사용하여 350 bp 크기의 증폭산물이 되도록 36 cycle의 PCR 반응을 진행해 증폭했다. PCR 반응산물을 아가로스 겔 전기 영동으로 분석한 결과, SMARTScribe™ RTase는 불과 10 copies의 합성 RNA에서도 단일 가닥 cDNA를 생성할 수 있었다. 이는 SMARTScribe™ RTase가 주형 RNA template에 좋은 감도를 보인다는 것을 의미한다. (Lane M: 100 bp DNA size marker)


그림 2. 타사 제품보다 더 sensitive한 SMARTScribe™ RTase.
Human Universal Total RNA를 10배씩 serial dilution(1 ㎍에서 0.1 pg까지)하여 SMARTScribe™ RTase(패널 A), 경쟁사 P(패널 B) 또는 경쟁사 Q(패널 C)를 사용하여 각 효소 제조업체의 매뉴얼에 따라 역전사반응을 실시하였다. 이후 각 RT 반응의 1 ㎕로 β-actin 유전자의 5' 말단에 특이적인 primer를 사용해 PCR 하였고, 아가로스 겔 전기영동으로 분석한 결과, SMARTScribe™ RTase는 모든 template 농도에서 뛰어난 감도를 나타냈다.
(각 반응에 사용된 template RNA의 양. Lane 1: 1 ㎍, Lane 2: 100 ng, Lane 3: 10 ng, Lane 4: 1 ng, Lane 5: 100 pg, Lane 6: 10 pg, Lane 7: 1 pg, Lane 8: 0.1 pg.)
내용
  • 100 U/㎕SMARTScribe™ Reverse Transcriptase
  • 5X First-Strand Buffer
  • 20 mM DTT
보존
- 20 ℃
관련 제품
Applications
- RT-PCR
- Real-time PCR/qPCR
- Gene expression analysis
- Cloning
- Library construction
- Microarray

Keyword :

Reverse Transcription (Clontech)
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