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Home > 전제품보기 > 단백질 발현 · 정제 > Overview > [개요] 차세대 단백질 정제, Capturem™

[개요] 차세대 단백질 정제, Capturem™

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[개요] 차세대 단백질 정제, Capturem™

다양한 종류의 단백질은 합성 및 정제하는 방법에 따라 실험 결과의 차이를 보일 수 있다. Capturem™ 기술은 Spin column 방식으로, 다양한 단백질과 항체를 단시간 내 고순도, 고효율로 정제, 추출 등에 적용할 수 있다. Spin column에는 novel nylon-based membrane가 결합되어있어 더욱 높은 protein binding capacity를 가질 수 있다. 따라서, 넓은 면적으로 Capacity가 크기에 표면적과 큰 용량 (Capacity)의 특성을 가지며, 많은 시간과 노력이 필요했던 기존 방법에 비해 빠른 시간 내에 막 통과가 가능해 변성이 없는 단백질을 정제 할 수 있다. 또한 낮은 압력으로 용액이 통과할 수 있어 단백질의 품질 저하를 방지하며, bed volume으로 고농도, 고순도로 정제된 단백질을 얻을 수 있다.

Capturem™ Workflow
Capturem™ 기술을 이용한 다양한 종류의 단백질 정제
Capturem™ 기술을 이용한 His-tagged protein 정제
- Capturem™을 이용한 His-tagged protein 정제 제품
 
Code
형태

Miniprep Column

Maxiprep column

96 Nickel plate

24 Nickel plate

Large volume unit
Input
sample
~ 800 ㎕
~ 25 ㎕
~ 1,000 ㎕
~ 4 ㎖
150 ~ 500 ㎖
용량
20 회
6 회
96 well
24 well
4 회
소요시간
5 분
15 분
15 분
15 분
15 ~ 30 분
정제농도
0.3 ~ 1 ㎎/㎖
1.6 ~ 4.5 ㎎/㎖
0.3 ~ 1 ㎎/㎖
~ 0.8 ㎎/1㎖
up to 2.0 ㎎/㎖
정제수율***
80㎍/column
1.5 ㎎/tube
80㎍/well
800㎍/well
10~25 ㎎/unit
Centrifuge
조건
11,000 x g, 1분
2,000 x g, 3분*
2,000 x g, 3분*
600 x g, 2분*
X
Vacuum
여부
X
X
O
O
O**
Buffer
포함 여부
O
O
X
X
X

* Maxiprep Kit에는 50㎖ tube용, 24well plate, 96well plate에는 각각 24well plate, 96well plate용 centrifuge가 필요합니다.
** Large volume의 경우, Vacuum source (e.g. vacuum pump equipped with a trap and a vacuum controller, or a peristaltic pump)가 필요하다.
*** 정제수율은 사용하고자 하시는 Sample type, species, antibody isotype에 따라 달라질 수 있습니다.



Capturem™ 기술을 이용한 Extracellular vesicle (EV) 추출
- Exosome과 같은 EV (Extracellular Vesicle)은 면역반응, 신경학적 기능 등의 생리작용뿐 아니라 암과 같은 질병에도 관여한다. 일반적으로 EV는 초원심분리를 통해 추출하였으나, 낮은 수율과 EV 손상, 비특이적인 핵산과 단백질의 혼입 등의 한계가 있었다. 또한 precipitation를 이용하여 추출된 EV는 순도와 수율이 낮았다. 하지만 Capturem™ 기술의 적용으로 EV를 매우 손쉽게 고순도, 고수율로 추출해낼 수 있게되었다.

- Capturem™을 이용한 Extracellular vesicle (EV) 추출 제품
제품명
Code
용량
20회
6회
적용 샘플
Various biological fluids
(such as plasma, serum, urine, milk, saliva)
Cell-conditioned media
Cell culture medium 전용
추출 양
Miniprep
(Column 당 최대 1010개 exosome 추출)
Maxiprep
(Column 당 최대 2*1011개 exosome 추출)
Exosome
추출 전
Amicon 100 kDA cut-off filters
(non-specific protein aggregates 제거)
-
Exosome
추출 후
3 kDa or 10 kDa MWCO filters the Sartorius Vivaspin 500 concentrator with a
100-kDa cutoff (Cat. No. VS0141)
Capturem™을 이용한 항체 정제 (Antibody)
- 다카라코리아에서는 monoclonal antibody, polyclonal antibody를 고품질로 빠르게 정제하고, 확인할 수 있는 Capturem™ 제품을 mini spin column, maxi column, 96-well와 같이 다양한 형태로 제공합니다. 또한, protein A agarose를 대체할 수 있는 thiophilicresins를 제공합니다.



- Capturem™을 이용한 항체 정제
분류
Code
제품명
용량
Protein A
Capturem™ Protein A Miniprep
Capturem™ Protein A Maxiprep
Capturem™ Protein A 96
Capturem™ Protein A 24-Well Plate
Protein G
Capturem™ Protein G Miniprep
Capturem™ Protein G Maxiprep
Capturem™ Protein G 96
Capturem™ Protein G 24-Well Plate
Immunoprecipitation
Capturem™ IP & Co-IP Kit
Biotinylated proteins
Capturem™ Streptavidin Miniprep Columns
Capturem™ Streptavidin 96-Well Plate

Capturem™을 이용한 protein digestion
- Mass spectrometry (MS) 분석을 위한 일반적인 단백질 분해는 약 4시간 이상 또는 Over-night의 시간이 필요한 반면, Capturem™ Trypsin과 Capturem™ Pepsin을 이용하면 실온에서 단백질 샘플을 단 몇 분 내에 아주 신속하고 효율적으로 분해할 수 있다. 따라서, 높은 재현성으로 고순도의 분해, 절단된 단백질을 얻을 수 있다.

- Capturem™을 이용한 protein digestion 제품
분류
Code
제품명
용량
Pepsin
Capturem™ Pepsin
Trypsin
Capturem™ Trypsin
Capturem™ Trypsin 96-Well Plate (Mass Spectrometry Grade)
Capturem™ Trypsin digestion for mass spectrometry
Capturem™ Trypsin Activation Buffer
Capturem™ Trypsin Miniprep Kit (Mass Spectrometry Grade)