[구성품 성분 변경 안내]
화학물질관리규제 강화로 인하여
Lot번호 AJG0826A 제품부터(2020년 2월 이후 출하예정)
구성품 중 하나인
Fixation solution에서 acetone과 ethanol이 제외될 예정이오니,
Acetone과 ethanol은 별도로 첨가하여 사용 바랍니다.
- TRACP (TRAP)와 ALP를 각각 또는 동시에 염색 가능
- Premix 형태의 시약으로 간편한 사용
- Fixation solution과 Nuclear stain 시약 기본 포함
- 세포, Frozen section에 염색 가능 [Paraffin section 적용불가]
제품설명
본 제품은 Bone-metabolism (골대사)에 관련된 세포를 염색하는 제품이다. Bone metabolism은 조골세포에 의한 골형성과 파골세포에 의한 골흡수의 상호 작용으로 진행된다.
2개의 enzyme marker를 동시에 검출하여, 골 관련 세포의 분화나 골조직의 분포를 관찰 할 수 있다.
본 제품은 조골세포 (Osteoblasts)의 enzyme marker인 Alkaline phosphatase (ALP)와 파골세포 (Osteoclasts)의 enzyme marker인 Tartrate-resistant acid phosphatase
(TRACP, TRAP)를 염색하기 위한 chromogenic substrates 및 핵 염색 시약을 포함하고 있다. TRACP & ALP double-stain Kit는 24 well plate 또는 slide glass에
배양된 세포의 Acid 및 Alkaline phosphatase 활성을 각각 또는 동시에 염색하여 비교할 수 있다. 또한, 시약은 premix 형태로 제공되어 간편하게 사용 가능하다.
결과
그림 1. 16주 JW토끼 (수컷)로부터 채취한 골수 세포에 M-CSF 및 활성형 비타민 D3 처리하여 6일간 배양 후 TRACP의 염색을 실시하였다.
그림 2. 생후 24일의 SD rat (암컷)으로부터 채취한 골수세포에 M-CSF와 활성형 비타민 D3를 첨가하여 10일간 배양 후 ALP 염색을 실시하였다.
그림 3. Human Bone Marrow Mononuclear cells에 여러 가지 첨가인자를 인자를 첨가하여 배양 후, 분화가 되었을 때 (9일) TRACP 및 ALP의 염색을 각각 실시하였다.
염색원리
1) Acid phosphatase 염색의 원리
Naphthol-AS-BI-phosphate
↓Acid phosphatase
HPO42-+ naphthol-AS
↓Fast Red Violet LB(Sodium azide)
Azo dye(적자색)(pH5.2)
2) Alkaline phosphatase 염색의 원리
Bromo-Chloro-Indolyl phosphate
↓Alkaline phosphatase
HPO42-+ Br-Cl-Indol
↓Nitro Blue Tetrazolium Chloride
Formazan dye(청자색)(pH9.5)
내용
1. Fixation solution |
30 ㎖ |
2. Sodium tartrate |
4 ㎖ |
3. Substrate for ACP (premixed) (NABP/ FRVLB) |
10 ㎖용×3 ea |
4. Substrate for ALP (premixed) (BCIP/ NBT) |
10 ㎖용×3 ea |
5. Nuclear stain Methyl green |
10 ㎖ |
보존 : -20℃ (사용 후, 각 시약에 적절한 온도에 보관 할 것)
