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Retro-X 선택 가이드

1. Choose Retroviral expression system
: 목적에 따라 다양한 시스템 선택 가능

2. Clone target gene
: 간편하고 정확한 Cloning 시스템 추천

Any vector, Any insert, Anyone
15분 내 cloning 반응 완료
90% 이상의 실험 정확도
: 불필요한 염기 추가가 없는 Seamless cloning
Subcloning 없이 다양한 application 적용
향상된 colony 형성 능력으로, 성공 효율 증가

3. Package Retrovirus
: 효율적인 Virus 생산을 위한 packaging system 제공

Retro-X™ Universal Packaging System (Code 631530)

Expression vector와 packaging vector를 co-transfection하여 원하는 tropism 선택
4개의 Envelope vector (pVSV-G, pEco, pAmpho, p10A1) 제공
HEK 293 유래의 전용 GP2-293 packaging cell 포함 (별도 구매 불가)

Pantropic Retroviral Expression System (Code 631512)

pVSV-G envelop vector를 이용하여, Pantropic Retrovirus packaging 가능
HEK 293 유래의 전용 GP2-293 packaging cell 포함 (별도 구매 불가)
Expression vector와 packaging vector를 co-transfection

Retro-X™ System (Code 631508)

NIH/3T3 유래의 전용 RetroPack PT67 cell line (Code 631510) 포함
Expression vector transfection 만으로 10A1 envelop을 가지는 dualtropic Retrovirus packaging 완료

[Envelope 별 감염 효율 비교]

Envelope		VSV-G	4070A (Ampho)	gap70 (Eco)	10A1 (Dual)
Tropism		Pantropic	Amphotropic	Ecotropic	Dualtropic
Receptor (target cell)		Unknown^**	RAM1 (Pit2)	mCAT-1	GALV (Pit1), RAM1 (Pit2)
Possible target cell types*	Human	+	+	-	+
	Mouse	+	+	+	+
	Rat	+	+	+	+
	Hamster	+	+/-	-	+
	Cat	+	+	-	+
	Dog	+	+	-	+
	Monkey	+	+	-	+
	Avian	+	-	-	-
	Fish	+	-	-	-
	Insect	+	-	-	-

^* This listing of the most commonly transduced target cell types is not intended to be exclusive.
^** It appears likely that a gp96 chaperone client is responsible for binding (Bloor et al. 2009)

4. Titrate Retrovirus
: 정확한 실험을 위한 다양한 Titration kit 보유

Retro-X™ qPCR Titration Kit (Code 631453)

All-in-one kit : MMLV 기반의 Retrovirus의 정제부터 qPCR까지
qPCR을 이용하여, 4시간 내 신속하게 바이러스 역가 측정
Virus genome copy 수를 측정하여 역가 확인

5. Concentrate Retrovirus
: 간편하게 샘플 내 역가 농축

Retro-X™ Concentrator는 retrovirus의 역가를 최대 100 배까지 농축할 수 있어, 더 많은 바이러스를 만들거나, 추가로 packaging 세포에 transfection할 필요 없이 충분히 높은 MOI로 목적세포를 감염시킬 수 있다.

Retro-X™ Concentrator (Code 631455)

초고속원심분리기 없이 바이러스 역가를 최대 100 배까지 증가
간단한 조작 과정 : Mix, wait and spin
번거로움 없이 부피를 쉽게 scale up 가능

6. Transduce target cells with enhancer
: 최고의 효율을 위한 support tool 제공

RetroNectin® (Recombinant Human Fibronectin Fragment) (Code T100A)

최고의 Transduction enhancer : Lentivirus, Retrovirus의 유전자 도입 효율 극대화
Low toxicity for cells : Polybrene, Protamine 대비 낮은 독성
Enhanced T cell expansion : 기존 T cell 확대배양법 대비 압도적인 T cell 확대배양 가능 (CAR-T cell 연구에 최적)
Research grade, GMP grade 선택 가능

7. Analyze integration
: 최고의 효율을 위한 support tool 제공

Retrovirus는 RNA genome virus로, DNA로 역전사되어 host genome에 무작위로 삽입되기 때문에 목적유전자 및 endogenous 유전자 발현에 영향을 줄 수 있다. 따라서, provirus의 삽입부위의 식별은 host cell의 표현형 연구에 중요하다.

Retro-X™ Integration Site Analysis Kit (Code 631467)

GenomeWalker를 기반으로 provirus의 게놈 삽입 부위 확인
MMLV 및 MSCV 타입의 retroviral vector에 적용 가능

Retro-X 선택 가이드

1. Choose Retroviral expression system : 목적에 따라 다양한 시스템 선택 가능

2. Clone target gene : 간편하고 정확한 Cloning 시스템 추천

3. Package Retrovirus : 효율적인 Virus 생산을 위한 packaging system 제공

4. Titrate Retrovirus : 정확한 실험을 위한 다양한 Titration kit 보유

5. Concentrate Retrovirus : 간편하게 샘플 내 역가 농축

6. Transduce target cells with enhancer : 최고의 효율을 위한 support tool 제공