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Home > 전제품보기 > Stem Cell > Endothelial Cell > iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation Kit
Human iPSC에서 고효율로 혈관내피세포 분화유도

iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation Kit

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)		 비고 사용자매뉴얼
Cellartis
 Y50300
 MiraCell® iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation Kit
관련학술 구매하기 		1 Kit
(Package) 		가격문의   주문 후 생산, 최소주문수량 있음 Y50300_e.v1905.pdf
Cellartis
 Y50053
 MiraCell® EC Culture Medium
관련학술 구매하기 		1 Set
(Package) 		가격문의   주문 후 생산, 최소주문수량있음

  • 보유 중인 human iPSC로부터 혈관내피세포 (Vascular endothelial cell)로 분화 유도
  • 다양한 human iPSC line에서 높은 분화 효율 (>80%) 확인
  • 분화 세포 선별을 위한 과정 (drug resistant marker 도입 또는 항체를 이용한 선별 방법 등)이 없는 간편한 실험
  • 분화 유도된 혈관내피세포는 동결 보존 및 확대 배양 가능
  • 분화 유도에 필요한 배지 및 구성품을 모두 포함한 All-in-One kit
제품설명
MiraCell® iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation Kit는 human iPSC를 혈관내피세포로 분화 유도시키는 제품이다. 본 제품은 Cellartis® DEF-CS 500 Culture System (Code Y30010)에서 배양된 human iPSC (T25 flask 1 개 (1.5×105 cells) 또는 6 well plate 3 well (1.8×105cells))를 혈관내피세포로 분화시키는데 필요한 plate coating reagent (2종)과 EC Differentiation Basal Medium (2종), Supplement (6종)가 포함되어 있다 (Day0 ~ Day11). 본 제품을 사용하여 분화된 고순도 혈관내피세포(CD31 양성률> 80%*)는 CD31, CD144 (VE-cadherin), Tie2, VEGFR2 등 혈관내피세포 marker 발현 및 tube 형성능 등을 보유하고 있는 것이 확인되었다.*
또한 분화 유도된 혈관내피세포는 Day12 이후 MiraCell® EC Culture Medium (Code Y50053)를 사용하여 장기간 확대 배양* 및 동결 보존이 가능하다. 
*분화된 혈관내피세포의 성능은 분화 유도한 iPSC line에 따라 다를 수 있습니다.
내용

구성품

제품명

용량

Package 1

Coating Reagent 1 (Day0 & 2)

0.35 ㎖

Supplement 1 (Day3)

0.42 ㎖

Supplement 2 (Day4)

0.33 ㎖

Supplement 3 (Day7)

0.3 ㎖

Supplement 4 (Day8)

1.2 ㎖

Supplement 5 (Day9)

1.0 ㎖

Supplement 6 (Day11)

1.8 ㎖

Package 2

Coating Reagent 2 (Day11)

1.5 ㎖

EC Differentiation Basal Medium 1 (Day3~9)

200 ㎖

EC Differentiation Basal Medium 2 (Day11)

50 ㎖

저장
Package 1: - 80 ℃
사용하기 직전까지 -80 ℃이하에서 냉동 보관하고, 해동 후 사용하려는 양만큼 소분하여 보관하십시오.
(재동결은 반드시 1회만 진행하십시오.)

Package 2: 4 ℃
동결하여 보관하지 마십시오.
실험 예
실험 예 1. 3종의 Human iPSC line에서 혈관내피세포 분화 유도 결과 비교
Donor가 다른 3종의 human iPSC line (ChiPSC12 (Code Y00285), ChiPSC18 (Code Y00305), ChiPSC19를 MiraCell® iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation Kit를 사용하여 혈관내피세포로 분화유도하였다. 분화가 종료된 Day12 이후, MiraCell® EC Culture Medium (Code Y50053)을 사용하여 추가 확대배양 하였다. 그 결과, 분화 직후 (Day11) 얇은 나뭇가지 형태에서 Day 16이후 혈관내피세포 형태로 변화한 것을 확인하였다 (그림. 1A). 또한, Day 16일 때, 혈관내피세포 marker (CD31, CD114, Tie2, VEGFR2)와 혈관 전구세포마커 (CD34, PROM1 [CD133])를 RT-qPCR을 사용해 정량한 결과, HUVEC과 유사하거나 더 높은 것을 확인하였다(그림. 1B).


그림 1. 3종의 human iPSC line에서 분화 유도된 혈관내피세포의 세포 형태 (A)와 marker 발현 (B)

실험 예 2. 3 종의 Human iPSC line에서 유도된 혈관 내피 세포의 장기간 순도 유지
서로 다른 3종의 iPSC line (실험 예 1과 동일)에서 혈관내피세포를 분화 유도한 후 MiraCell® EC Culture Medium을 사용하여 Day32까지 배양하고, 배양 과정에서 혈관내피세포 순도의 변화를 Flow cytometry (CD31+, CD144+ cell)를 사용하여 분석하였다. 그 결과, 3종류의 iPSC에서 분화된 혈관내피세포 모두 90 % 이상 고순도를 유지함을 확인하였다.


그림 2. 3 종의 human iPSC line 유래 혈관내피세포의 장기 배양에 의한 순도 변화 확인
*각 범례 오른쪽 ( ) 안의 수치는 Day8 세포 수 대비, Day32의 세포 확대배양 비율을 나타낸다.

실험 예 3. Human iPSC 유래 혈관내피세포를 이용한 tube 형성능 시험
MiraCell® iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation Kit를 사용하여 유도된 혈관내피세포를 Day16에서 동결 보존하고, 해동 후 배양 8 일째 Angiogenesis Assay Kit (Promocell사)를 사용하여 tube 형성을 유도한 결과, 그림 3과 같이 tube 형성을 확인할 수 있었다.br>

그림 3. Human iPSC 유래 혈관내피세포를 이용한 tube 형성 결과
사용상의 주의
MiraCell® iPS Cell to Endothelial Cell Differentiation Kit는 iHeart Japan 주식회사로부터 라이선스를 체결하여 다카라바이오가 제조 및 판매하고 있습니다.

Keyword :
Endothelial Cell
>
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