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Bisulfite 처리 후의 DNA PCR 증폭에 최적

TaKaRa EpiTaq HS (for bisulfite-treated DNA)

제조사	제품코드	제품명	용량	가격 (부가세별도)	비고	사용자매뉴얼
Takara	R110A	TaKaRa EpiTaq HS (for bisulfite-treated DNA)	250 U	354,000원
Takara	R110B	TaKaRa EpiTaq HS (for bisulfite-treated DNA)	1,000 U (R110A x 4)	1,274,400원

Product index

Overview
DNA Methlyation 연구
Methylated DNA 분리와 분석
- Magnetic Stand
Chromatin 면역 침감 (ChIP)
ChIP-seq, Cut&Run-seq (NGS..
miRNA 발현 · 정량
Epigenetics를 위한 Cloning..
- Online In-Fusion Tools
- Mighty TA-cloning Kit

Uracil(U)을 많이 포함한 DNA 증폭에 최적
Anti-Taq antibody를 이용한 hot start PCR 효소로 비특이적 증폭 억제
GC-rich target, AT-rich target의 효율인 증폭 가능
증폭 산물의 3＇말단에 A가 부가, 그대로 TA 클로닝에 사용 가능

제품설명

TaKaRa EpiTaq™ HS (for bisulfite-treated DNA)는 bisulfite sequencing이나 COBRA법 등의 분석을 위해 bisulfite 처리 후 Uracil을 많이 포함하는 DNA를 주형으로 PCR 증폭시 최적인 PCR 효소이다.
Bisulfite 처리한 DNA는 PCR 반응성에 변화가 있을 수 있지만, 본 효소는 마그네슘 농도나 dNTP 농도를 조정함으로서 증폭 효율, 반응 특이성을 조절할 수 있기 때문에 지금까지 증폭할 수 없었던 타겟에서도 양호한 증폭을 실시할 수 있다.
본 효소는 anti-Taq antibody를 포함한 hot-start PCR 효소로 고온 가열할 때까지는 anti-Taq antibody가 효소에 결합해 polymerase 활성을 억제하기 때문에, PCR cycle 전의 mis-primming이나 primer dimer에서 유래하는 비특이적 증폭을 막을 수 있다. Anti-Taq antibody는 PCR initial denaturation 과정에서 변성되어 분리되므로, 효소 활성화를 위한 별도의 과정을 추가할 필요가 없다.

[주의] Bisulfite 처리한 DNA를 이용하여, 메틸화 특이적 PCR (Methylation Specific PCR: MSP) 분석을 진행할 경우에는 EpiScope^® MSP Kit (Code R100A/B)의 사용을 추천한다.

내용 (50 ㎕ 반응 계, 200회)

1. TaKaRa EpiTaq HS (5 U/㎕)	250 U
2. 10×EpiTaq PCR Buffer (Mg²⁺ free)	1 ㎖
3. dNTP Mixture (각 2.5 mM)	1.2 ㎖
4. 25 mM MgCl₂	1.2 ㎖

보존 - 20℃

실험 예

1. Bisulfite 처리한 HeLa genomic DNA의 PCR
TaKaRa EpiTaq™ HS (for bisulfite-treated DNA)는 1 kb가 넘는 타겟을 포함, 다양한 사이즈의 타겟 영역에서 잘 증폭되는 것을 확인하였다.

주형	: Bisulfite 처리한 HeLa genomic DNA (100 ng/50 ㎕ 반응액)
타겟	: CDH1, MLH1, BRCA1 gene 상류의 CpG island 영역

2. Bisulfite 처리 DNA의 효율적인 증폭
TaKaRa EpiTaq™ HS와 타사 bisulfite 처리 DNA용 PCR 효소로 bisulfite 처리한 HeLa genomic DNA를 증폭한 결과, 두개의 타겟 모두 TaKaRa EpiTaq™ HS에서 가장 양호한 증폭을 확인하였다.

TaKaRa EpiTaq HS (for bisulfite-treated DNA)

제품설명

내용 (50 ㎕ 반응 계, 200회)

보존 - 20℃

실험 예

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