[선택가이드] His-tag 융합 단백질 정제
[선택가이드] His-tag 융합 단백질 정제
단백질을 정제하는데 있어 가장 간단한 방법은 항체를 이용하는 것이지만, 모든 단백질에 대한 항체가 확립되지 않았기 때문에 단백질에 Tag를 부착하는 방법이 많이 사용되고 있다. 많은 연구자들은 단백질을 정제하기 위해 His-tag를 이용하는데, his-tag는 작은 크기로 단백질 기능과 구조에 큰 영향을 미치지 않으며, N- 혹은 C- terminus 어디에 위치하든 native protein, denatured protein을 정제할 수 있기 때문이다.
분류 |
6xHis tag |
6xHN tag |
HAT tag |
크기 |
Small tag 6 amino acids |
Histidine-rich peptide 12 amino acids |
천연 유래 polyhistidine peptide 18 amino acids |
위치 |
C- / N-terminus | C- / N-terminus | N-terminus |
특징 |
낮은 단백질 기능 간섭 저분자 단백질에 최적 |
높은 용해도 고분자 단백질에 최적 |
높은 용해도 안정적인 단백질 발현 고분자 단백질에 최적 |
His-tag 융합 단백질을 정제할 때에는 금속 친화성을 이용하며, 주로 nickel 이온과 cobalt 이온을 기반으로 한 resin이 많이 사용된다.
Ni2+은 더 많은 양의 단백질을 얻을 수 있고, Co2+은 더 높은 순도의 단백질을 얻을 수 있다.
Capturem™ Ni Spin column |
분류 |
TALON® resin / His60 Ni resin |
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원리 |
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Small |
Bed volume |
Large |
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5~15 분 |
정제 시간 |
60~120 분 |
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간편한 프로토콜 낮은 bed volume으로 고농도 단백질 획득 18종의 다양한 첨가제 적용 가능 (βME, EDTA, DTT 등) |
특징 |
IMAC (Immobilized Metal Affinity Chromatography) Gravity/batch column, FPLC 등 다양한 응용 |
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Capturem™ His-tagged Purification Miniprep Kit |
발현여부 확인 |
제품 |
높은 순도의 단백질 정제 |
TALON® Metal Affinity Resin |
Capturem™ His-tagged Purification Maxiprep / Large volumn type |
편리하게 scale-up |
더욱 많은 양의 단백질 정제 |
His60 Ni Superflow Resin | |
Purity |
Yield |
Binding capacity (㎎ protein / ㎖ matrix) |
소요시간 (분) |
Ease of use |
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| Capturem His-Tagged Purification Miniprep Kit |
**** |
800 ㎍/mini spin column |
100 ㎎/㎖ |
5 분 |
***** |
| His60 Ni resin | **** |
60 ㎎/㎖ resin |
60 ㎎/㎖ |
60-120 분 |
*** |
| TALON resin | ***** |
20 ㎎/㎖ resin |
20 ㎎/㎖ |
60-120 분 |
*** |
| Magnetic Beads | ***** |
15 ㎎/㎖ resin |
15 ㎎/㎖ |
60 분 |
**** |
