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Home > 전제품보기 > Genome Editing > 편집 유전자 도입 > Recombinant Cas9 단백질
Electroporation delivery를 위한 Cas9 단백질

Recombinant Cas9 단백질


제조사 제품코드 제품명 용량 가격
비고 사용자매뉴얼
Guide-it™ Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready)
관련학술 구매하기 라이선스 
3x100 ug
837,000원  제조사 페이지로 바로가기 x32692
Guide-it™ Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready)
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100 ug
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Guide-it™ Recombinant Cas9 (10 µg/µl)
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200 ug
737,000원  제조사 페이지로 바로가기 x254749
Guide-it™ Recombinant Cas9 (10 µg/µl)
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500 ug
1,373,000원  제조사 페이지로 바로가기

제품 특징



단백질 농도

Glycerol 농도

#632641, #632640

Guide-it™ Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready)

3 μg/μl

10% 미만

#632678, #632679

Guide-it™ Recombinant Cas9 (10 μg/μl)

10 μg/μl


  • The Cas9 protein solution is sterile and well-tolerated by mammalian cells
  • Highly efficient editing when combined with Guide-it Complete sgRNA Screening System (Code 632636)
  • Minimizes off-target effects-better than plasmid-based delivery systems
  • Works well in hard-to-transfect cell lines
Guide-it™ Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready)은 Streptococcus pyogenes 유래의 Cas9 재조합 단백질로써 CRISPR/Cas9 gene editing 실험에 사용할 수 있도록 C-terminal nuclear-localization signal (NLS) 변형이 되어 있다. Cas9-sgRNA ribonucleoprotein(RNP) 복합체의 electroporation은 빠른 시간 내 gene editing이 가능하도록 하며, 또한 off-target effect를 최소화 할 수 있다.
본 제품은 Transfection 시약에 의한 RNP delivery에도 적용 가능하며, 이 경우 Mirus의 TransIT-X2 Dynamic Delivery System (Code MIR 6000) 사용을 추천한다 (그림 4. 참조)

그림 1. Gene knockouts in the Cellartis hiPSC-18 cell line. The strength of the cleaved bands gives a semiquantitive estimate of the percentage of edited cells. As can be seen, the Guide-it recombinant Cas9, when combined with sgRNA from the Guide-it In Vitro Transcription Kit, provides consistent and effective gene editing for many targets. Numbers at the bottom of each gel represent gene editing efficiencies (expressed as a %) for the indicated RNPs.

그림 2. Homology-directed repair at the AAVS1 or CXCR4 genes. A template containing a HindIII restriction site was inserted into the AAVS1 gene, and a template containing both a HindIII and a BamHI restrictrion site was inserted into the CXCR4 gene. Gene targets were then amplified from target cells using PCR and analyzed by restriction digest. Editing efficiencies are shown above each positive well on the gel. The extra band in the BamHI digest of the CXCR4 gene is due to a second BamHI site already present in the wild-type gene before editing.

그림 3. Guide-it™ Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready)과 타사 Cas9 단백질의 Konck-out 효율 비교
Guide-it™ Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready)과 타사의 Cas9 protein을 이용하여, Human iPS cell에서 CD81 유전자를 타겟하는 sgRNA-Cas9 RNP 복합체를 Neon Transfection System (Thermo Fisher Scientific)으로 Electroporation 도입하였다. 그 결과, 타사의 Cas9 단백질에 비하여 월등히 높은 Knock-out 효율을 얻을 수 있었다 (자사 실험데이터, n=2x3 times)

그림 4. Guide-it™ Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready)와 TransIT-X2를 이용한 iPS cell gene editing
PPIB (Cyclophili B)에 대한 2개의 guide RNA (gRNA)와 Cas9 protein (타사 제품 또는 Guide-it Recombinant Cas9 protein) 복합체 (RNP)를 형성하였다. 그 후, RNP 복합체를 TransIT-X2 Dynamic Delivery System (Code MIR 6000) (1㎕/well 첨가, 24-well plate, Mirus Bio) 를 이용하여 iPS cell (KOLF-2, Wellcome Trust Sanger Institute)에 Transfection 방식으로 도입하였다. 여러 농도의 guide RNA를 조합한 RNP 복합체 도입 후, T7E1 mismatch detection으로 절단 효율을 확인한 결과 타사 제품 대비하여 보다 높은 절단효율을 확인할 수 있었다.
관련 제품
Guide-it Complete sgRNA Screening System (Code 632636)
- Gene delivery에 적용가능한 10-20ug의 고수율, 고순도 sgRNA 합성
- sgRNA candidates 중 가장 editing 효율이 높은 sgRNA 스크리닝

TransIT-X2 Dynamic Delivery System (Code MIR 6000)
- DNA, siRNA, miRNA 각각 또는 Co-transfection 가능한 만능 Transfection 시약
- CRISPR/Cas9을 위한 sgRNA-Cas9 RNP delivery에도 효율적
Application Note
TransIT-X2 Dynamic Delivery System (Code MIR 6000)을 이용한 Genome Editing 예시
- 293T Cell Line 적용 예시 (클릭)
- K562 Cell Line 적용 예시 (클릭)
- Human iPS Cell 적용 예시 (클릭)

Keyword : RNP,Ribonucleoprotein,Cas9 protein,Knockout,Knock out,KO,Knock-out,KI,Knock in, Knockin,CRISPR,CRISPR/Cas9,Cas9,sgRNA,크리스퍼,gene editing,유전자편집

편집 유전자 도입
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