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Virus 상청액에서 직접 4 시간에 RNA titer 를 측정

Titer Set (for Real Time PCR)

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Takara
6166
Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR)
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100 반응분
408,000원  6166_e.v1904Da.pdf

내용 (100 반응 분 ; 25㎕ 반응계*1)
Forward Titer Primer FRT-1 (10 pmol/㎕) 50 ㎕
Reverse Titer primer RRT-1 (10 pmol/㎕) 50 ㎕
RNA Control Template (5 × 108 copies/㎕) 10 ㎕
EASY Dilution (Real Time PCR 용) 1 ㎖ × 2
DNase I (RNase Free) (5 U/㎕) 40 ㎕
10 × DNase I Buffer 50 ㎕
RNase Inhibitor (porcine liver) (40 U/㎕) 10 ㎕
*1 Real Time RT- PCR 100회 그리고 DNase I 처리 20회임.
보존 -20℃
RNA Control Template는 반복적인 동결 융해에 의한 분해를 막기 위하여 소량 분주 후 Deep freezer (-70∼-80℃)에서 저장하는 것을 추천합니다.
제품설명
본 제품은 Real Time RT-PCR을 이용하여 MLV (murine leukemia virus) 유래 retrovirus vector의 RNA genome 량을 측정하여 역가(RNA titer)을 산출하는 제품이다.
본 제품을 One Step TB Green™ PrimeScript RT-PCR Kit (Perfect Real Time) (Code RR066A/RR086A)과 함께 사용하여 바이러스 상등액에서 직접 RNA titer를 측정할 수 있고, 약 4시간 안에 결과를 얻을 수 있다. 또한, MLV의 packaging signal부분을 증폭 대상으로 하고 있어 거의 모든 MLV 유래 Retrovirus의 역가(RNA titer)를 측정할 수 있다.
Retrovirus의 감염 역가를 측정할 경우 일반적으로 표적 세포에 Retrovirus를 감염시키고 형광이나 약제내성 등을 이용하여 감염효율을 측정해 역가 (생물학적 titer)을 산출하는 방법이 이용된다. 이 방법은 수일이 소요되며, 마커유전자나 약제내성유전자가 포함되지 않은 Retrovirus vector에는 적용할 수 없다. 또한 생물학적 titer를 기준으로 MOI (multiplicity of infection)를 측정해 세포에 감염시킬 경우, 역가 측정에 며칠이 소요되므로 일단 바이러스 상등액을 동결 보존할 필요가 있고, 동결 융해에 의해 바이러스 역가가 저하될 가능성이 있으므로 초기 측정값과는 다른 MOI의 바이러스가 실험에 이용될 수 있다.
본 제품은 Retrovirus의 RNA genome량을 측정하기 때문에 마커유전자나 약제내성유전자와는 관계없이 역가를 측정할 수 있다. 또한 약 4시간 만에 측정 결과를 얻을 수 있으므로 바이러스 상등액을 동결하지 않고 원하는 MOI로 감염시킬 수 있다. 함께 사용하는 One Step TB Green™ PrimeScript RTPCR Kit (Perfect Real Time) 은 TB Green™ 검출에 의한 1 step Real Time RT-PCR 키트이다. 신장성이 뛰어나 단시간에 효율적으로 cDNA 합성이 가능한 역전사 효소 PrimeScript 와 다카라의 대표적인 PCR 효소인 TaKaRa Ex Taq HS를 이용하여 1 step RT-PCR에 최적화하고 있으며 안정적으로 1 step real time RT-PCR을 실시할 수 있다.
이외에 필요한 시약
One Step TB Green™ PrimeScript RT-PCR Kit (Perfect Real Time) (TaKaRa Code RR066A)
또는 One Step TB Green™ PrimeScript RT-PCR Kit II (Perfect Real Time) (TaKaRa Code RR086A)

Keyword :
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Retrovirus
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