다카라코리아바이오메디칼

Home > 전제품보기 > Gene transfer (virus) > Adeno-Associated Virus (AAV) > Titration Kit (qPCR)

다양한 AAV serotype의 빠르고 정확한 역가 측정

Titration Kit (qPCR)

제조사	제품코드	제품명	용량	가격 (부가세별도)	비고	사용자매뉴얼
Takara	6233	AAVpro® Titration Kit (for Real Time PCR)	100 회	682,000원

Product index

AAV2 ITR 유래의 다양한 AAV serotype 정량 가능
빠르고 간편하게 약 2.5시간만에 AAV 정량 완료
일반적인 DNA blot 또는 ELISA 방법 대비 정확한 titration 측정 가능
Packaging cell line에서 AAV 추출, Real Time PCR까지 필요한 모든 구성품 포함

제품 설명

Adeno-Associated Virus (AAV)는 분열, 비분열 세포에 유전자 도입이 가능하며, 특히 비분열 세포에 대해 장기간 유전자 발현이 가능하다. 또한 면역원성 (immune response)이 낮아 in-vivo 실험에 최적화된 virus이다.
AAV의 역가측정은 일관된 실험 결과와 감염 조직 및 감염 방법에 최적인 AAV의 양의 결정을 위해 매우 중요하다.

1. AAVpro^® Titration Kit (for Real Time PCR) Ver.2 (Code 6233)

AAVpro^® Titration Kit (for Real Time PCR)은 다카라가 독자적으로 개발한 Real Time PCR방식의 titration 방법을 사용하여, 빠르고 효율적으로 AAV의 역가를 측정할 수 있다. 본 제품에는 AAV packaging cell line으로부터 AAV를 추출하여, Real Time PCR 정량을 위한 시약까지 모두 포함되어 있다. AAV의 vector 양 말단에 존재하는 ITR (Inverted Terminal Repeat)을 target으로 AAV의 genome을 검출하기 때문에, 기존의 DNA blot 또는 ELISA 법에 비해 빠르고 정확한 결과를 얻을 수 있으며, 다양한 AAV serotype^*1에 적용할 수 있다.
^*1 AAV2유래의 ITR (일반적으로 사용)을 검출하므로, ITR영역이 AAV2로부터 유래한 서열이면 serotype에 관계없이 정량 가능하다.

그림 1. AAVpro^® Titration Kit (for Real Time PCR) Ver.2 workflow

그림 2. AAVpro^® Titration Kit (for Real Time PCR)의 Titer 측정 효율 비교.
AAV1, 2, 6를 생산하는 packaging cell line으로부터 AAVpro^® Extraction Solution을 사용하여 AAV를 추출하였다. 그 후, AAV의 ITR 과 CMV 부분을 각각 타겟하여 Real Time PCR의 정량값을 비교하였다 (ITR: AAVpro^® Titration Kit (for Real Time PCR) Ver.2). 본 데이터는, AAVpro^® Titration Kit가 AAV2 ITR 유래의 다양한 serotype AAV 정량에 이용 가능하다는 것을 나타낸다.

2. AAVpro^® Extraction Solution (Code 6235)
다카라가 독자적으로 개발한 AAV extraction시약으로, 기존의 freeze/thaw 또는 sonication법과 같이 번거로운 과정없이 빠르고 효율적으로 AAV packaging cell line으로부터 AAV를 추출할 수 있다 (특허 출원 중). 본 제품은 다양한 serotype의 AAV에 사용 가능하며, 숙주 (host) 유래 단백질과 핵산 오염이 낮은 AAV를 추출 가능하다.

[관련 제품]
<AAVpro^® Purification Kit>
일반적인 AAV 정제 방법인CsCl2/iodixanol gradient ultracentrifugation 법은 고도의 숙련된 기술을 필요로 하며, 바이러스 회수율이 낮고, 추출된 AAV의 낮은 감염성과 시간이 오래 소요되는 단점이 있다.
AAVpro^® Purification Kit를 사용하면 약 4시간만에 편리하고, 빠르게 AAV를 정제 할 수 있다.

AAVpro^® Purification Kit (All Serotype)는 다양한 AAV serotype을 간편하게 정제할 수 있는 제품
AAVpro^® Purification Kit (AAV2)는 가장 범용적으로 사용되는 Serotype인 AAV serotype2 (AAV2)를 간편하고 효율적으로 정제할 수 있는 제품

내용

AAVpro^® Titration Kit (for Real Time PCR) Ver.2 (Code 6233, 100 회)

1.	AAV 추출
	AAV Extraction Solution A	1.5 ㎖× 2
	AAV Extraction Solution B	300 ㎕
2.	AAV genome 간이추출 (100 샘플분)
	DNase I	100 ㎕
	10×DNase I Buffer	200 ㎕
	Lysis Buffer	1 ㎖× 2
3.	Real Time PCR (100 rxns: 25 μl 반응시)
	TB Green™ Premix Ex Taq II	625 ㎕× 2
	AAV Forward Titer Primer	20 ㎕
	AAV Reverse Titer Primer	20 ㎕
	dH₂O	1 ㎖× 3
	ROX Reference Dye	50 ㎕
	ROX Reference Dye II	50 ㎕
	Positive Control	50 ㎕
	EASY Dilution (for Real Time PCR)	1 ㎖× 5

AAVpro^® Extraction Solution (Code 6235, 1 set)

1.	AAV Extraction Solution A	25 ㎖
2.	AAV Extraction Solution B	2.5 ㎖

보존

AAVpro^® Titration Kit (for Real Time PCR) Ver.2 (Code 6233)

TB Green™ Premix Ex Taq II: 4℃, 차광 (장기 보존시 -20℃, 융해 후에는 4℃ 보존)
그 외: -20 ℃ (AAV Extraction Solution A, B, Lysis Buffer는 융해 후는 실온 저장)

AAVpro^® Extraction Solution (Code 6235) : 실온

Keyword : Adeno Associated Virus,in vivo,aav virus

Adeno-Associated Virus (AAV)

Overview - All about AAV

Adeno-associated virus 제작에 최적인

Packaging (293T Cell Line)

Helper Free 시스템에 의한 다양한 serotype의 ..

AAV1, 2, 5, 6 Vector System

Cre-Recombinase 유전자를 탑재한 AAV1, AAV2, ..

CRE Recombinase System

β-galactosidase 유전자를 탑재한 AAV1, AAV2,..

LacZ System

형광단백질이 포함된 AAV vector

pAAV-ZsGreen1 Vector

Adeno-associated virus delivery-CRISRP/Cas9 ..

CRISPR/Cas9 Vector System

SaCas9를 이용한 AAV mediated CRISPR Genome E..

CRISPR/SaCas9 Vector System (AAV2)

AAV2 Delivery Tet 유도발현 시스템

Tet-Inducible System (AAV2)

다양한 serotype의 AAV 정제에 최적

Purification Kit Maxi/Midi (All Serotypes)

AAV Serotype 2 정제 kit

Purification Kit (AAV2 전용)

AAV를 효율적으로 농축

AAVpro® Concentrator

다양한 AAV serotype의 빠르고 정확한 역가 측..

Titration Kit (qPCR)

간편한 AAV 추출시약

Extraction Solution