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Home > 전제품보기 > cDNA 합성 > Reverse Transcription (Clontech) > SMARTScribe Reverse Transcriptase

SMARTScribe Reverse Transcriptase

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)		 비고 사용자매뉴얼
Clontech
 639536
 SMARTScribe Reverse Transcriptase
관련학술 구매하기 샘플신청  		40 rxns
 184,000원  제조사 페이지로 바로가기 x33065
Clontech
 639537
 SMARTScribe Reverse Transcriptase
관련학술 구매하기 		100 rxns
 398,000원  제조사 페이지로 바로가기
Clontech
 639538
 SMARTScribe Reverse Transcriptase
관련학술 구매하기 		400 rxns
 1,428,000원  제조사 페이지로 바로가기

  • 최대 14.7 kb의 full-length cDNA 합성
  • 적은 양의 샘플 적용 가능
  • 주형 RNA의 cmoplexity 유지
  • 전사체의 5’ end 분석 가능
제품설명
SMARTScribe™ Reverse Transcriptase 은 편향성(bias)이 없이 cDNA를 합성하는 고성능 효소로, 모든 RNA 전사체에서 증폭 및 라이브러리 구축이 가능하다. SMARTScribe™ RTase는 주형 RNA 샘플의 비율을 보존하면서, 긴 전사물에서 full-length cDNA (14.7 kb 까지)를 합성하는 개선된 Moloney Murine Leukemia Virus reverse transcriptase (MMLV RTase)이다. 당사만의 정제 공정과 엄격한 품질 관리 기준을 통해 SMARTScribe™ RTase에 오염을 일으킬 수 있는 nucleases를 모두 제거하였음을 확인하였다.

본 효소는 다양한 응용 분야에 적용 가능해 당사의 SMART® technology를 기반으로 하는 NGS 제품과 함께 사용되도록 특별 제작되었다.

그림 1. SMARTScribe™ RTase의 뛰어난 감도.
SMARTScribe™ RTase 및 합성 RNA를 사용하여 RT-PCR을 진행하였다. 합성 RNA를 10배씩 serial dilution하여 샘플 당 105 - 10 개 copies를 얻었다. 그런 다음 희석한 주형을 HeLa 세포의 Total RNA 50 ng에 첨가하여 복잡성을 증가시켰다. 이렇게 준비한 샘플과 SMARTScribe™ RTase로 합성한 first-strand cDNA를 Advantage® 2 DNA Polymerase Mix와 특이적인 primer를 사용하여 350 bp 크기의 증폭산물이 되도록 36 cycle의 PCR 반응을 진행해 증폭했다. PCR 반응산물을 아가로스 겔 전기 영동으로 분석한 결과, SMARTScribe™ RTase는 불과 10 copies의 합성 RNA에서도 단일 가닥 cDNA를 생성할 수 있었다. 이는 SMARTScribe™ RTase가 주형 RNA template에 좋은 감도를 보인다는 것을 의미한다. (Lane M: 100 bp DNA size marker)


그림 2. 타사 제품보다 더 sensitive한 SMARTScribe™ RTase.
Human Universal Total RNA를 10배씩 serial dilution(1 ㎍에서 0.1 pg까지)하여 SMARTScribe™ RTase(패널 A), 경쟁사 P(패널 B) 또는 경쟁사 Q(패널 C)를 사용하여 각 효소 제조업체의 매뉴얼에 따라 역전사반응을 실시하였다. 이후 각 RT 반응의 1 ㎕로 β-actin 유전자의 5' 말단에 특이적인 primer를 사용해 PCR 하였고, 아가로스 겔 전기영동으로 분석한 결과, SMARTScribe™ RTase는 모든 template 농도에서 뛰어난 감도를 나타냈다.
(각 반응에 사용된 template RNA의 양. Lane 1: 1 ㎍, Lane 2: 100 ng, Lane 3: 10 ng, Lane 4: 1 ng, Lane 5: 100 pg, Lane 6: 10 pg, Lane 7: 1 pg, Lane 8: 0.1 pg.)
내용
  • 100 U/㎕SMARTScribe™ Reverse Transcriptase
  • 5X First-Strand Buffer
  • 20 mM DTT
보존
- 20 ℃
관련 제품
Applications
- RT-PCR
- Real-time PCR/qPCR
- Gene expression analysis
- Cloning
- Library construction
- Microarray

Keyword :
Reverse Transcription (Clontech)
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