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1 step qRT-PCR premix

5X One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Kit

제조사	제품코드	제품명	용량	가격 (부가세별도)	비고	사용자매뉴얼
Clontech	638337	5X One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Kit, no ROX, GPR	1,000 Rxns (XU0002 x 5)	3,528,000원 ~~4,410,000원~~	09.01 ~ 10.30	,

Product index

Overview
Real Time PCR 기기
cDNA 합성 (Real Time PCR ..
Intercalator TB Green 검출
Dual-Labeled Probe 검출
Cell direct qPCR
TB Green 검출(Clontech)
- TB Green® Advantage q..
- Terra qPCR Direct TB G..
CycleavePCR 검출
병원체ㆍ유전자 검출 (Real ..
- Bacteria (tuf g..
- Transgene Detection Pr..

5X premix 타입의 1 step RT-qPCR kit (Probe 검출법)
높은 재현성과 일관된 성능 보장
복잡한 RNA template에서도 효율적이고 특이적인 정량 가능
Crude RNA extracts 포함한 다양한 샘플에 적합

제품설명

5X One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Kit는 probe-based RT-qPCR을 하나의 tube 내에서 연속적으로 실시하는 5X premix 시약이다. 내열 및 저해제 내성 역전사효소인 PrimeScript™ III RTase와 효율적이고 특이적인 Hot Start PCR 효소 TaKaRa Taq HS가 최적화된 버퍼에 premix되어 있다. 하나의 tube 내에서 역전사 및 qPCR 반응을 진행하여 조작이 빠르고 간편하며 오염의 위험을 낮출 수 있다.

또한 5X 농도의 premix로 pre-amplification 단계 없이 1 step RT-qPCR 분석의 검출 한계 (LoD)를 향상시켜 시간과 비용을 절약할 수 있다. PrimeScript™ III RTase는 PrimeScript™ RT의 특이성과 견고함을 유지하면서 내열성 (최대 55°C)이 향상되어, 더 복잡한 2차 구조를 가진 RNA로부터 cDNA 합성이 가능하다. Heparin (blood) 및 humic acid (soil)과 같은 다양한 반응 억제물질에 대하여 내성이 뛰어나 다양한 시료의 1 step RT-qPCR을 안정적으로 수행할 수 있다.

내용

5X One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Kit, ROX plus, GPR (Code 638336, 1,000회; 25㎕ 반응 시)

	구성품	용량
1	5X One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix, ROX plus, GPR	1 ㎖ × 5
2	RNase Free H₂0	1.5 ㎖ × 10

5X One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Kit, no ROX, GPR (Code 638337, 1,000회; 25㎕ 반응 시)

	구성품	용량
1	5X One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Kit, no ROX, GPR	1 ㎖ × 5
2	RNase Free H₂0	1.5 ㎖ × 10

특징

- 본 제품은 고농축 (5X) Probe-based One Step RT-qPCR premix로 multiplex RT-qPCR에 적합하며, 유전자 발현 및 RNA 바이러스 검출과 같은 다양한 응용 분야에 사용할 수 있다.
- 본 제품은 다양한 반응 억제물질에 높은 저항성을 나타내므로, 간이 핵산추출 시약을 이용하여 추출한 crude RNA 샘플*에서도 Real Time RT-PCR 분석이 가능하다.
(＊다만, 검출 불능일 경우나, 보다 정밀한 안정된 해석 결과를 필요로 하는 경우에는 순도 높은 RNA 샘플을 이용한다.)
- 배양 세포나 조직 샘플의 고순도 total RNA 정제 시 추천 제품
: TaKaRa MiniBEST Universal RNA Extraction Kit (Code 9767A)
: RNAiso Plus (Code 9108/9109)

보존 -20°C

5X One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Kit 적용 데이터

그림 1. RT-qPCR 실험 소요 시간 절약
5X One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Kit와 3가지 주요 경쟁사의 RT-qPCR kit의 실험 소요 시간을 비교한 결과, 5X One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Kit을 이용 시 가장 빠르게 결과를 확인할 수 있었다.

그림 2. 반응 억제물질에 대한 내성 실험
반응 억제물질인 hematin 및 heparin을 반응 용액에 첨가하여 5X One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Kit, Takara 기존 제품 (2X One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Kit, Code RR600A) 및 타사 제품의 저해 물질에 대한 내성을 테스트하였다. 5X One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Kit는 다른 제품보다 hematin 및 heparin 내성이 더 높은 것으로 확인되었다.

그림 3. Multiplex 분석에 최적
5X One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Kit, GPR은 개발 시 SARS-CoV-2 검출과 같은 분자 병원체 검출 분석에 사용하도록 설계되었다. CDC 기반 COVID RT-qPCR 검출을 위하여 serial dilution한 SARS-CoV-2 positive control과 5X One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Kit, GPR mix를 사용하여 multiplex 발현 해석 (N1, N2, RP)을 실시하였다. 그 결과, 모든 실험에서 R²=0.99를 충족시켰다. (A) Amplification plots (B) Standard Curve plots (R²=0.99)