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목적 세포의 유전자에 삽입된 Provirus copy number 정량

Provirus Quantitation Kit

제조사	제품코드	제품명	용량	가격 (부가세별도)	비고	사용자매뉴얼
Clontech	631239	Lenti-X™ Provirus Quantitation Kit	200 회 (Package)	1,029,000원		, ,

Product index

실험 간의 transgene expression level을 예측 가능
여러 세포 주간의 형질도입 데이터 비교
실험 간 또는 다른 세포주 간의 일관된 copy number 확보
Genomic DNA purification kit 10회분, TB Green qPCR premix 200회분 포함

목적세포의 nuclear DNA에 삽입된 lentivirus의 양을 정량함으로써, Lentiviral supernatant stock 내에 존재하는 실제 역가 (real titer, effective titer)와 MOI (Multiplicity of infection)를 보다 정확하게 측정할 수 있다. 이를 통하여 얼마나 많은 바이러스 유전체 (viral genome)이 목적 세포에 삽입이 되었는지를 예측할 수 있다.
Lenti-X™ Provirus Quantitation Kit는 tranduced cell 내의 삽입된 렌티바이러스 (integrated lentivirus (provirus))의 copy number를 빠르게 정량할 수 있는 제품이다. 본 제품은 genomic DNA purification kit와 200회분의 TB Green qPCR premix 및, calibrated control template를 포함하고 있다.

* 본 제품 내에 포함된 primer는 Packaging Signal에 인접한 HIV-1 genome 영역을 증폭할 수 있도록 디자인되어 있습니다. 본 프라이머는 다카라바이오에서 판매하는 모든 Lentivirus vector 뿐만 아니라 일반적으로 사용되는 HIV-1 based lentiviral vector에 호환 가능합니다. 만약, vector compatibilty를 확인하고자 한다면, 고객지원센터 (TEL. 02-2081-2510)로 연락 바랍니다.

그림 1. Measuring lentiviral copy number in target cells. Provirus content is determined using a rapid qPCR method.

그림 2. Lentiviral provirus copy number affects transgene expression levels in transduced cells. HT1080 cells were infected at either high or low MOI using an AcGFP1 lentiviral expression vector. 72 hr after infection, the cells were subjected to puromycin drug selection. One week later, stably transduced clones were selected for expansion and analysis. AcGFP1 expression levels were determined using flow cytometry, and provirus content in genomic DNA was determined using the Lenti-X Provirus Quantitation Kit. The figure represents data pooled from two groups having either low copy number (>3; n = 8) or high copy number (>9; n = 7). Higher provirus contents were associated with higher expression levels.

그림 3. Equivalent virus amounts in different cell types results in different provirus (integrated lentivirus) copy numbers. Equivalent amounts of a single lentiviral stock (100 μl) were used to infect either HT1080, HeLa, and HEK 293 cells. 72 hr after infection, the cells were subjected to drug selection with puromycin. One week later, the provirus copy numbers of the stably transduced cell populations were determined using the Lenti-X Provirus Quantitation Kit.

구성품 (자세한 내용은 CoA를 참조하세요)

Lenti-X Provirus Quantitation Components
NucleoSpin Tissue Kit (10 preps)
TB Green Advantage qPCR Premix (200 rxns)

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Provirus 삽입위치 분석: Lenti-X™ Integration Site Analysis Kit (Code 631263)

Keyword : Lentivirus,virus,Lenti,렌티,렌티바이러스,정량,역가,titer,titration,provirus,프로바이러스,integrated virus,삽입 바이러스,moi

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