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단백질/바이러스 정제시 핵산제거

NucleoGone™ Endonuclease

-

제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Takara
2490A
NucleoGone™ Endonuclease
관련학술 구매하기
25,000 U
340,800원 
426,000원
가격할인
09.01 ~ 10.30
x348255

  • 세포 추출액등의 샘플에서 DNA 및 RNA (single/double-stranded, linear/circular)를 다양한 조건에서 분해
  • 시료의 점성을 줄여 정제시 단백질/바이러스의 회수율 향상
제품설명
이 제품은 DNA와 RNA를 효율적으로 분해하는 효소로 다양한 조건에서 적용이 가능하여 host cell에서 단백질 혹은 virus를 정제하는 경우 혼재하는 핵산의 분해 및 제거에 사용하여 정제 효율을 향상시킬 수 있다.


그림1. 다양한 종류의 효소에 핵산 분해능력 비교
NucleoGone™ Endonuclease와 타사의 효소를 각각 사용해 다양한 핵산을 digestion하고 agarose gel에서 전기영동한 결과이다. NucleoGone™ Endonuclease는 타사의 효소보다 높거나 동등한 핵산 분해능력을 보였다.
내용: NucleoGone™ Endonuclease 25,000 U
농도: 100 U/㎕
기원
Escherichia coli carrying a plasmid that encodes the gene for NucleoGone Endonuclease
일반적인 성질
- 분자량: 약 27 kDa
활성의 정의
- 37℃, 30분 반응 후 활성화된 salmon sperm DNA의 260nm 흡광도를 1.0으로 증가시키는 효소 활성을 1U으로 한다.
활성 측정용 반응액의 조성

50 mM

 

Tris-HCl (pH8.0)

1 mM

 

MgCl2

0.01%

 

BSA

0.5 ㎎/㎖

 

활성화된 salmon sperm DNA

용도
- 바이러스 (e.g. AAV) 정제 단계에서 host cell 유래 gDNA 제거
- 단백질 정제 단계에서 세포 용해액의 점도 감소
반응 조건
1. 최적조건: 아래의 조건에서 활성을 유지하는 것이 확인되었습니다.

 

최적조건

반응조건

온도

37~42℃

4~42℃

pH

8~10

7~10

Na+, K+

0~100 mM

0~300 mM

Mg2+

1mM

0.01mM

DTT

0~50 mM

0 mM

2-mercaptoethanol

0~200 mM

0 mM

Sodium deoxycholate

0~0.1%

0~1%

Triton X-100

0~1%

0~1%

2. 억제조건: 활성은 2mM 이상의 EDTA로 완전히 억제된다.
3. 불활성 조건: 효소의 활성을 완전히 실활시키려면 100mM로 NaOH를 넣고 70℃에서 30분 가열한다.
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