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RT-PCR 필수품

Recombinant DNase I (RNase-free)

제조사	제품코드	제품명	용량	가격 (부가세별도)	비고	사용자매뉴얼
Takara	2270A	Recombinant DNase I (RNase-free)	1000 U	115,000원
Takara	2270B	Recombinant DNase I (RNase-free)	5,000 U (2270A x 5)	520,000원

Product index

제품설명

본 효소는 단일 가닥, 이중 가닥 DNA 그리고 DNA와 RNA의 hybrid를 무작위로 분해하여 5’-phosphate 말단을 가지는 oligonucleotide를 생성하는 endodeoxyribonuclease이다. Mg2+ 존재 하에서는 이중 가닥 DNA에 무작위로 nick을 만들지만, Mn2+ 존재 하에서는 이중 가닥을 동시에 절단하여 DNA를 단편화한다.
본 효소는 활성에는 영향이 없을 수준까지 protease 및 RNase 활성을 제거하여 중성 pH에서 안정성이 향상되어 RNA 조제시 안전하게 이용할 수 있다.

보존 -20℃

농도 5 U/㎕

형상

20 mM		Tris-HCl (pH7.5, 4℃)
50 mM		NaCl
0.1 mM		CaCl₂
50%		Glycerol

기원

Expressed in non-animal host carrying plasmid encodes the gene of bovine pancreas DNase I.

첨부 buffer 조성 (10x)

400 mM		Tris-HCl, pH7.5
80 mM		MgCl₂
50 mM		DTT

활성의 정의

25℃, pH5.0에서 송아지 흉선 DNA를 기질로 1분에 OD₂₆₀를 0.001 증가시키는 효소 활성을 1 U으로 한다. (Kunitz unit)

활성 측정용 반응액 조성

100 mM		Sodium acetate (pH5.0, 25 ℃)
5 mM		MgSO₄
40 ㎍ / ㎖		송아지 흉선 DNA

용도

- T7 또는 SP6 Polymerase를 이용한 in vitro transcription 후 RNA 샘플에서 버퍼 교환 없이 주형 DNA를 제거한다.
- DNA Polymerase I (Code 2130)과 같이 사용해서 nick translation에 사용한다.
- Mn²⁺가 존재할 때 shot-gun sequencing을 위한 DNA library 제작에 사용한다.
- DNA와 단백질의 상호작용을 분석하기 위한 foot-printing analysis에 사용한다.
- RT-PCR 전 gDNA제거에 사용한다.

일반적 성질

- 분자량: 약 39,000
- 최적 pH: pH7.0~pH8.0 (2가 양이온이 존재할 때 최대 활성을 보인다.)
- 저해제: EDTA
- 안정성: 75℃, 10분의 열처리에서 비가역적으로 불활성화된다.

Keyword :

수식효소／Nuclease、Topoisomerase

BAL 31 Nuclease

DNA Topoisomerase I

Cloned

Exonuclease I

Cloned

Exonuclease III

Micrococcal Nuclease

Mung Bean Nuclease

RT-PCR 필수품

Recombinant DNase I (RNase-free)

Cloned

Ribonuclease H (RNase H)

S1 Nuclease