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저온에서 단백질 용액 중의 핵산 제거와 점성을 감소시킴

Cryonase™ Cold-active Nuclease

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제조사 제품코드 제품명 용량 가격
(부가세별도)
비고 사용자매뉴얼
Takara
2670A
Cryonase™ Cold-active Nuclease
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10,000 U
128,000원  2670A_e.v1702Da.pdf
Takara
2670B
Cryonase™ Cold-active Nuclease
관련학술 관심상품등록 구매하기 라이선스 
50,000 U
576,000원 

  • 낮은 온도에서 모든 형태의 RNA, DNA의 분해 (single-stranded, double-stranded, linear, circularized)
  • Bacteria에서 단백질 추출시 gDNA제거를 통한 lysate의 점성 감소
  • 단백질 전기 영동시, 샘플에 포함된 gDNA, RNA 제거를 통한 점성 감소
  • 다양한 샘플에 포함된 바이러스 정제시의 전처리 과정에서 사용
제품설명
Cryonase™ Cold-active Nuclease는 저온균 Shewanella sp. 유래의 endonuclease를 재조합 대장균에서 발현·정제한 것이며, 모든 DNA와 RNA (단일 가닥, 이중 가닥, 선형, 원형)를 저온에서 절단 가능하다. 
Cryonase™ Cold-active Nuclease는 낮은 온도인 얼음 위에서도 활성을 나타내어 단백질 등 열에 불안정한 물질을 포함한 sample에서 nucleic acid를 분해 할 때 유용하다.
보관
- 20℃
형상

10 mM

Tris-HCl, pH7.5

20 mM

NaCl

2 mM

MgCl2

50 %

Glycerol

결과
M : λ-Hin d III digest
1 : without nuclease
2 : +DNase I, 0.256 U
3 : +DNase I, 2.56 U
4 : +DNase I, 25.6 U
5 : +Cryonase Cold-active Nuclease, 0.256 U
6 : +Cryonase Cold-active Nuclease, 2.56 U
7 : +Cryonase Cold-active Nuclease, 25.6 U
(The protocol for xTractor Buffer
Kit specifies the use of 0.256 U.)

그림 1. SDS-PAGE를 통한 단백질 추출물의 분석. sample buffer를 첨가하여 끓인 세포 추출물은 4 ul 씩 well에 첨가하여 SDS-PAGE를 실시하였다. 얼음 위에서 Cryonase Cold-active Nuclease는 약 10배 많은 DNase I과 동일한 효과를 보였다. Cryonase Cold-active Nuclease는 얼음 위에서도 추출된 단백질에 영향 없이 점도를 낮추기 때문에, 단백질 추출시 유용하게 활용 가능하다.
참고자료
  • 각 온도에 대한 상대 활성
  • pH의 영향
       적정 pH 범위 : 7.0 ~ 9.0
       유효 pH 범위 : 6.0 ~ 10.0
  • Mg2+ 각 농도의 상대 활성 (pH 7.5, 37℃)
       적정 Mg2+ 농도 범위 : 60 ~ 120 mM

Keyword :
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