´Ý±â
TaKaRa
Á¦Ç°¸í/Á¦Ç°ÄÚµå
Å°¿öµå°Ë»ö
°Ë»ö
´Ý±â
  • °í°´Áö¿ø 
  • ¾÷¹«¾È³»¦¢Á¦Ç°¹®ÀÇ
  • ÀüÈ­¹øÈ£¦¢02-2081-2510
  • Email     ¦¢support@takara.co.kr
  • ´ëÀüÁö»ç 
  • ¾÷¹«¾È³»¦¢´ëÀü/ÃæûÁö¿ª ÁÖ¹®, Á¦Ç°¹®ÀÇ
  • ÀüÈ­¹øÈ£¦¢042-828-6525
  • Email     ¦¢tkbd@takara.co.kr
  • ¾÷¹«½Ã°£¾È³»
  • [ Æò¡¡¡¡ÀÏ ] 09 : 00 ~ 18 : 00 ¦¢ [ Á¡½É½Ã°£ ] 12 : 00 ~ 13 : 00
  • Å䡤ÀÏ¿äÀÏ, °øÈÞÀÏÀº ÈÞ¹«ÀÔ´Ï´Ù.
Cloning¿ë ligase

T4 DNA Ligase

-

Á¦Á¶»ç Á¦Ç°ÄÚµå Á¦Ç°¸í ¿ë·® °¡°Ý
(ºÎ°¡¼¼º°µµ)
ºñ°í »ç¿ëÀڸŴº¾ó
Takara
2011A
T4 DNA Ligase
°ü·ÃÇмú ±¸¸ÅÇϱâ
25,000 U
65,000¿ø  2011A_DS.v2106Da.pdf
Takara
2011B
T4 DNA Ligase
°ü·ÃÇмú ±¸¸ÅÇϱâ
125,000 U (2011A x 5)
295,000¿ø 

  • T4 DNA LigaseÀÇ ÀϹÝÀûÀÎ »ç¿ë ¿¹
  • T4 DNA Ligase¸¦ »ç¿ëÇÑ DNA ´ÜÆíÀÇ ligation ¹ÝÀÀ °á°úÀÇ ¿¹
Á¦Ç°¼³¸í
º» È¿¼Ò´Â ÀÎÁ¢ÇÑ DNAÀÇ 5'-P¸»´Ü°ú 3'-OH¸»´ÜÀ» phosphodiester °áÇÕÀ¸·Î ¿¬°áÇÏ´Â È¿¼ÒÀÌ´Ù. º¸Á¶ÀÎÀÚ·Î ATP¸¦ ÇÊ¿ä·Î ÇÏ°í, ¹ÝÀÀ Áß°£»ê¹°·Î enzyme-ATP complex°¡ ¸¸µé¾îÁ® ÀÌ°ÍÀÌ DNA¿¡ ÀÛ¿ëÇÑ´Ù. º» È¿¼Ò´Â µ¹Ã⸻´Ü (cohesive end), ÆòÈ°¸»´Ü (blunt end)À» ¿¬°áÇÏ´Â È°¼ºÀ» °¡Áø´Ù. ¶ÇÇÑ ±ØÈ÷ ³·Áö¸¸ DNA¿Í RNA, RNA³¢¸®µµ ¿¬°áÇÏ´Â È°¼ºÀ» °¡Áö°í ÀÖ´Ù.
º¸Á¸
-20¡É
³óµµ
350 U/§¡
ÇüÅÂ

10 mM

Tris-HCl (pH7.5)

50 mM

KCl

1 mM

DTT

0.1 mM

EDTA

50£¥

Glycerol

÷ºÎ buffer Á¶¼º (10x)

660 mM

Tris-HCl (pH7.6)

66 mM

MgCl2

100 mM

DTT

1 mM

ATP

È°¼ºÀÇ Á¤ÀÇ
6 §¶/20 §¡ÀÇ ¥ëDNA-HindIII ºÐÇع°À» 16¡É¿¡¼­ ¾à 30ºÐµ¿¾È 90% ÀÌ»ó ligation ½ÃÅ°´Â È¿¼Ò È°¼ºÀ» 1 U·Î ÇÑ´Ù.
º» È¿¼ÒÀÇ 1 U´Â ATP-PPi±³È¯ ¹ÝÀÀÀÇ 0.008 Weiss Unit¿¡ ÇØ´çÇÑ´Ù.
[Weiss Unit ÃøÁ¤¿ë ¹ÝÀÀ¾× Á¶¼º]

66 mM

Tris-HCl (pH7.6)

6.6 mM

MgCl2

10 mM

DTT

66 ¥ìM

ATP

3.3 ¥ìM

[ 32P] Na 4P 2O 7

¼øµµ
-2000 UÀÇ º» È¿¼Ò¿Í 1 §¶ÀÇ ¥ëDNA-HindIII ºÐÇع°À» 37¡É, 16½Ã°£ ¹ÝÀÀÇÏ¿©µµ Àü±â¿µµ¿ ÆÐÅÏ¿¡´Â º¯È­°¡ ÀϾÁö ¾Ê´Â´Ù.
-2000 UÀÇ º» È¿¼Ò¿Í 1 §¶ÀÇ supercoiled pBR322 DNA¸¦ 37¡É, 16½Ã°£ ¹ÝÀÀÇÏ¿©µµ Àü±â¿µµ¿ ÆÐÅÏ¿¡´Â º¯È­°¡ ÀϾÁö ¾Ê´Â´Ù.
-2000 UÀÇ º» È¿¼Ò¿Í 1 §¶ÀÇ 16S, 23S rRNA¸¦ 37¡É, 16½Ã°£ ¹ÝÀÀÇÏ¿©µµ Àü±â¿µµ¿ ÆÐÅÏ¿¡´Â º¯È­°¡ ÀϾÁö ¾Ê´Â´Ù.
È°¼º ÃøÁ¤¿ë ¹ÝÀÀÁ¦ Á¶¼º

66 mM

Tris-HCl ¿ÏÃæ¿ë¾× (pH7.6)

6.6 mM

MgCl2

10 mM

DTT

0.1 mM

ATP

6 §¶/20 §¡

¥ëDNA-HindIII ºÐÇع°

»ç¿ë»óÀÇ ÁÖÀÇ
Ligation ¹ÝÀÀÀº ¸»´Ü ¿°±â¼­¿­ÀÇ Á¾·ù¿¡ µû¶ó ¹ÝÀÀ ¼Óµµ°¡ ´Ù¸£´Ù. ÀϹÝÀûÀ¸·Î ´ÙÀ½°ú °°Àº °æÇâÀÌ ÀÖ´Ù.
  • µ¹Ã⸻´Ü(cohesive end) ligation
    HindIII£¾ Pst I£¾ EcoRI£¾ BamH I£¾ Sal I
    (Hind III site´Â Sal I siteº¸´Ù 10~40¹è ºü¸£°Ô LigationÇÑ´Ù)
  • ÆòÈ°¸»´Ü(blunt end) ligation
    Hae III£¾ Alu I£¾ Hinc II£¾ Sma I
    (Hae III site´Â Sma I siteº¸´Ù 5~10¹è ºü¸£°Ô LigationÇÑ´Ù)
    EcoR V£¾ Sca I£¾Pvu II£¾ Nru I
¿ëµµ
-Insert¿Í DNA¿Í vector DNA¿ÍÀÇ ¿¬°á
-DNA ´ÜÆí °£ÀÇ ¿¬°á ¶Ç´Â ¾î´ðÅÍ DNA¿ÍÀÇ ¿¬°á
±â¿ø
Escherichia coli carrying the plasmid that encodes the gene of T4 DNA ligase
ÀϹÝÀû ¼ºÁú
- ºÐÀÚ·®: ¾à 62,000
- ¼Ò´ÜÀ§: single polypeptide
- ÃÖÀû pH: pH7.6 (pH7.2~pH7.8, Tris-HCl)
(pH6.9·Î 46%, pH8.0¿¡¼­ 65%¿¡ È°¼º ÀúÇÏ)
- º¸Á¶ ÀÎÀÚ: ATP
- È°¼ºÈ­Á¦
2°¡ ¾çÀÌ¿Â: Mg2+ (ÃÖÀû³óµµ: 10mM)
ȯ¿øÁ¦: DTT, 2-mercaptoethanol
(2-mercaptoethanolÀÌ ´õ È¿°ú°¡ Å©´Ù.)
- ÀúÇØÁ¦
dATP (±æÇ× ÀúÇØÁ¦)
°í³óµµ ÀÏ°¡ ¾çÀÌ¿Â: 200 mM Na+, 200 mM K+
(10% Æú¸®¿¡Æ¿·»±Û¸®ÄÝ (PEG)ÀÌ Á¸ÀçÇÒ ¶§´Â ¹Ý´ë·Î È°¼ºÈ­ ÀÛ¿ëÀ» º¸ÀδÙ.)
´Ù´ç·ù: heparin, carrageenan
°ü·ÃÁ¦Ç°
- ½ÇÇè¸ñÀûº°·Î ¼±ÅÃÇÏ´Â Cloning Kit ¼±Åð¡À̵å - ¸µÅ©
- DNA Ligation Kit ¡´Mighty Mix¡µ (Code 6023)
- Mighty TA-cloning Kit (Code 6028)
- Mighty TA-cloning Reagent Set for PrimeSTAR¢ç (Code 6019)
T4 DNA Ligase¿Í E. coli DNA Ligase Ư¼º ºñ±³

 

T4 DNA Ligase

E. coli DNA Ligase

ºÐÀÚ·®

¾à 62,000

¾à 77,000

ÃÖÀû pH

7.2~7.8

7.5~8.0

Á¶È¿¼Ò (coenzyme)

ATP

NAD

ȯ¿øÁ¦

ÇÊ¿ä

ºÒÇÊ¿ä

ÆòÈ°¸»´ÜÀÇ ¿¬°á

°¡´É

ºÒ°¡´É (+PEG·Î °¡´É)

µ¹Ã⸻´ÜÀÇ ¿¬°á

°¡´É

°¡´É


Keyword :

¼ö½ÄÈ¿¼Ò£¯Ligase
>
Cloning¿ë ligase
T4 DNA Ligase