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Cloned

Terminal Deoxynucleotidyl Transferase

제조사	제품코드	제품명	용량	가격 (부가세별도)	비고	사용자매뉴얼
Takara	2230A	Terminal Deoxynucleotidyl Transferase	300 U	76,000원
Takara	2230B	Terminal Deoxynucleotidyl Transferase	1,500 U	342,000원

Product index

농도 7~15 U/㎕

형상

60 mM	Potassium Phosphate (pH7.2)
150 mM	KCl
1 mM	2-Mercaptoethanol
50%	Glycerol

보존 -20℃

첨부 Buffer 조성 (5×)

500 mM	HEPES (pH7.2)
40 mM	MgCl₂
0.5 mM	DTT
0.1 %	BSA (별첨)

제품설명

본 효소는 반응에 주형을 필요로 하지 않고, 단일가닥 또는 이중가닥 DNA의 3’- OH 말단에 deoxynucleotide를 중합하는 반응을 촉매한다. 프라이머가 되는 최저 3염기 이상의 oligonucleotide가 필요하다.

TdT를 이용한 단일 중합체의 부가 반응의 조건은
   1. 부가하는 염기의 종류 (dATP, dTTP, dGTP, dCTP)
   2. 버퍼 중의 2가 이온의 종류 (Mn²⁺, Co²⁺, Mg²⁺)
   3. 부가되는 DNA의 말단구조 (돌출 3’- OH말단, 평활말단, 함몰 3’- OH말단) 등의 영향을 받기 때문에 상황에 따라 최적의 조건을 찾아야 한다.

활성의 정의

DNase 처리 후 열변성 송아지 흉선 DNA (활성화 송아지 흉선 DNA)를 initiator로 사용하여 37℃, pH7.2 조건에서 1시간동안 모든 1 nmol의 [3H]dATP를 산불용성 침전물의 합성기질로 바꾸는 효소활성 1 U으로 한다.

활성 측정용 반응액 조성

67 mM	Tris-HCl (pH8.8)
6.7 mM	MgCl₂
16.6 mM	(NH4)₂SO₄
10 mM	2-Mercaptoethanol
6.7 μM	EDTA
0.0167%	BSA
0.2 mg/ml	기질 DNA
각 330 μM	dCTP, dATP, dGTP
330 μM	[³H]dTTP

순도

- 15 U의 본 효소와 1㎍의 λDNA-Hind III 분해물을 37℃, 16시간 반응하여도 DNA의 전기영동 패턴에 변화가 없다.
- 15 U의 본 효소와 1㎍의 closed circular (RF I) pBR322 DNA를 37℃, 16시간 반응하여도 DNA의 전기영동 패턴에 변화가 없다.
- 15 U의 본 효소와 1㎍의 16S 및 23S RNA를 37℃, 5시간 반응하여도 RNA 의 전기 영동 패턴에 변화가 없다.

용도

- Okayama-Berg법에 의한 벡터-cDNA에 상보적인 단일 중함체의 부가
- 표식 dNTP 또는 ddNTP에 의한 DNA의 3’말단표식

Keyword :

수식효소／DNA Polymerase、RNA Polymerase

Cloned

DNA Polymerase I (E. coli )

Cloned

Klenow Fragment (Large Fragment E. coli DNA Polymerase I)

Poly(A) Polymerase

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SP6 RNA Polymerase

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T4 DNA Polymerase

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T7 RNA Polymerase

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Terminal Deoxynucleotidyl Transferase