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Cloned

T4 Polynucleotide Kinase

제조사	제품코드	제품명	용량	가격 (부가세별도)	비고	사용자매뉴얼
Takara	2021A	T4 Polynucleotide Kinase	1,000 U	89,000원
Takara	2021B	T4 Polynucleotide Kinase	5,000 U	400,500원

Product index

농도 10 U/㎕

형태

50 mM	Tris-HCl (pH7.5)
50 mM	KCl
1 mM	DTT
0.1 ㎛	ATP
50%	Glycerol

보존 -20℃

첨부 Buffer 조성(10×)

500 mM	Tris-HCl (pH8.0)
100 mM	MgCl₂
50 mM	DTT

표식하지 않고 인산화 반응을 실시할 때는 반응액에 최종농도 1 mM이 되도록 ATP를 첨가해 주십시오.
단, 본 효소에 ATP는 첨부되지 않습니다.

기원

Escherichia coli carrying the high expression system of T4 pseT gene

제품설명

본 효소는 DNA 또는 RNA의 5’ 말단에 ATP의 γ위치에 인산기를 첨가하는 효소이다. ATP 존재하에서는 5’- OH 말단의 인산화 반응(인산화 전이반응)이 일어나지만, 5’-P 말단이 기질인 경우 ADP가 존재하면 역반응이 일어나 5’ 말단에 탈인산화 반응이 일어난다. 이때, 표식한 ATP를 첨가하면 인산전이반응도 동시에 일어나 5’ 말단이 표식된 것과 교환이 일어난다(교환반응).

활성의 정의

형질전환 효율
Micrococcal nuclease로 활성화 한 송아지 흉선 DNA를 기질로 하여 37℃, pH7.6에서 30분 동안 1 nmol의〔 γ-32P〕ATP를 산불용성 침전물로 바꾸는 효소활성을 1 U으로 한다.

활성측정용 반응액 조성

50 mM	Tris-HCl (pH7.6)
10 mM	MgCl₂
10 mM	2-Mercaptoethanol
100 μM	〔γ-³²P〕ATP
0.2 mg/ml	5’-OH DNA

순도

- 10 U의 본 효소와 1 ㎍의 λDNA-Hind III 분해물을 37℃, 24시간 반응하여도 DNA의 전기영동 패턴에 변화가 없다.
- 1 U의 본 효소와 1 ㎍의 16S와 23S rRNA를 37℃, 24시간 반응하여도 RNA의 전기영동 패턴에 변화가 없다.

용도

- DNA와 RNA의 5’말단의 표식
- 합성 DNA linker의 5’말단의 인산화