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Deletion Mutant 제작에

Kilo-Sequence 용 Deletion Kit

제조사	제품코드	제품명	용량	가격 (부가세별도)	비고	사용자매뉴얼
Takara	6030	Kilo-Sequence 용 Deletion Kit	5 회	244,000원

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제품설명

본 제품은 M13 Phage vector (mp18/19), pUC 계열 plasmid 또는 phagemid vector (pUC18/19)의 MCS (Multiple Cloning Site)에 cloning되어 있는 긴 DNA 단편의 sequencing을 위해 개발되었다. 타겟 DNA를 말단에서 한 방향으로 분해해서 각각 길이가 다른 clone을 효과적으로 제작할 수 있다. 이를 통해 vector에 있는 primer binding site와 insert 사이에 DNA를 제거하거나, 이렇게 deletion된 subclone들을 효과적으로 self-circularization할 수 있다. 이 kit는 Henikoff의 방법과 Yanisch-Perron의 방법을 개량한 방법이다.

내용 (5 회)

Exonuclease III (180 U/㎕)	10 ㎕
Exo III Buffer	500 ㎕
Mung Bean Nuclease (25 U/㎕)	20 ㎕
B solution	500 ㎕
Klenow Fragment (2 U/㎕)	10 ㎕
Klenow Buffer	250 ㎕
Ligation Solution A *	500 ㎕
Ligation Solution B *	60 ㎕

* DNA Ligation Kit Ver.1 (Code 6021)에 포함된 시약과 동일

보존 -20℃

용도

- DNA sequencing
- 길이가 긴 DNA 단편의 sequencing

Long DNA fragment의 sequencing 원리

이 제품은 M13계 또는 pUC계 vector 등에 삽입된 DNA 단편의 3’-recessed end 또는 평활말단 (blunt end)을 Exonuclease III의 이중 가닥 특이적 3’→5’ exonuclease 활성을 이용해 단일 가닥 DNA로 만든다. 이 단일 가닥 DNA 부분을 Mung Bean Nuclease와 Klenow fragment의 활성으로 평활말단 (blunt end)으로 만들 수 있다. 본 kit를 사용해서 긴 DNA 단편을 sequencing에 적당한 크기의 deletion mutant로 제작할 수 있다. 또한, 목적 region만을 포함한 clone을 제작할 수 있다.

* M13mp18 BamH I site에 cloning된 DNA 단편을 deletion 시키는 경우

Keyword :

TA-Cloning, 평활말단 Cloning

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