´Ý±â
TaKaRa
Á¦Ç°¸í/Á¦Ç°ÄÚµå
Ű¿öµå°Ë»ö
°Ë»ö
´Ý±â
  • °í°´Áö¿ø¼¾ÅÍ 
  • ¾÷¹«¾È³»¦¢ÇмúÁö¿ø
  • ÀüÈ­¹øÈ£¦¢02-2081-2510
  • Email     ¦¢support@takara.co.kr
  • ´ëÀüÁö»ç 
  • ¾÷¹«¾È³»¦¢´ëÀü/ÃæÃ»Áö¿ª ÁÖ¹®, ÇмúÁö¿ø
  • ÀüÈ­¹øÈ£¦¢042-828-6525
  • Email     ¦¢tkbd@takara.co.kr
  • ¾÷¹«½Ã°£¾È³»
  • [ Æò¡¡¡¡ÀÏ ] 09 : 00 ~ 18 : 00 ¦¢ [ Á¡½É½Ã°£ ] 12 : 00 ~ 13 : 00
  • Å䡤ÀÏ¿äÀÏ, °øÈÞÀÏÀº ÈÞ¹«ÀÔ´Ï´Ù.

DNA Topoisomerase I

-

Á¦Á¶»ç Á¦Ç°ÄÚµå Á¦Ç°¸í ¿ë·® °¡°Ý
(ºÎ°¡¼¼º°µµ)
ºñ°í »ç¿ëÀڸŴº¾ó
Takara
2240A
DNA Topoisomerase I
°ü·ÃÇмú ±¸¸ÅÇϱâ
100 U
84,800¿ø 
106,000¿ø
°¡°ÝÇÒÀÎ
03.02 ~ 04.30
2240A_DS.v1901Da.pdf
Takara
2240B
DNA Topoisomerase I
°ü·ÃÇмú ±¸¸ÅÇϱâ
500 U
477,000¿ø 

³óµµ 5~20 U/§¡
Çü»ó
20 mM Potassium Phosphate (pH7.2)
50 mM KCl
0.05 mM EDTA
5 mM 2- Mercaptoethanol
0.02% BSA
50% Glycerol
º¸Á¸ -20¡É
÷ºÎ Buffer Á¶¼º(10¡¿)
350 mM Tris-HCl (pH8.0)
720 mM KCl
50 mM MgCl2
50 mM DTT
50 mM Spermidine
0.1% BSA(º°Ã·)
±â¿ø
Calf thymus
Á¦Ç°¼³¸í
º» È¿¼Ò´Â ±×¸² 1¿¡ ³ªÅ¸³½ 4Á¾·ùÀÇ ¹ÝÀÀÀ» Ã˸ÅÇÏ´Â È¿¼ÒÀÌ´Ù. ¼Û¾ÆÁö Èä¼± À¯·¡À̹ǷΠ¿øÇÙ »ý¹° À¯·¡È¿¼Ò¿Í ¼ºÁúÀÌ ´Þ¶ó, Mg2£«°¡ Á¸ÀçÇÏÁö ¾Ê¾Æµµ Ȱ¼ºÀ» ³ªÅ¸³½´Ù. ¶Ç ¿øÇÙ »ý¹°ÀÇ DNA Topoisomerase IÀÌ (-)ÀÇ supercoil ºÐÀÚ¿¡¸¸ ÀÛ¿ëÇϴµ¥ ¹ÝÇØ º» È¿¼Ò´Â (+), (-)ÀÇ supercoil ºÐÀÚ¸¦ Ç®¼ö ÀÖ´Ù(±×¸² 1).

±×¸² DNA Topoisomerase IÀÌ Ã˸ÅÇÏ´Â ¹ÝÀÀ
1. DNAÀÇ supercoil »óŸ¦ ÀÌ¿Ï
2. ssDNA ºÐÀÚ ³»¿¡ DNA °¡´ÚÀÇ ¸ÅµìÀ» ¸¸µé°Å³ª(knotting), ¿ªÇüÅ·ÎÀÇ ¹ÝÀÀ (unknotting)
3. »óº¸ÀûÀÎ ¿°±â¼­¿­À» °®´Â ssDNA·ÎºÎÅÍ ds closed circular DNA ºÐÀÚ¸¦ Çü¼ºÇÏ´Â ¹ÝÀÀ
4. µÎ ds circular DNA ºÐÀÚÀÇ ¾î´À ÇÑÂÊ¿¡ nickÀÌ Á¸ÀçÇÒ °æ¿ì µÎ ºÐÀÚÀÇ ¿¬°á¹ÝÀÀ
(catenation) ¶Ç´Â ¿ªÀÇ ¹ÝÀÀ(decatenation)À» Ã˸Å
Ȱ¼ºÀÇ Á¤ÀÇ
0.5 §¶/50 §¡ÀÇ supercoiled pBR322 DNA¸¦ 37¡É¿¡¼­ 30ºÐ µ¿¾È 100% relaxed formÀ¸·Î Àüȯ½ÃŰ´Â È¿¼ÒȰ¼ºÀ» 1 UÀ¸·Î ÇÑ´Ù.
Ȱ¼º ÃøÁ¤¿ë ¹ÝÀÀ¾× Á¶¼º
35 mM Tris-HCl(pH8.0)
72 mM KCl
5 mM MgCl2
5 mM DTT
5 mM Spermidine
0.01% BSA
0.5 §¶/50 §¡ Supercoiled pBR322 DNA
¼øµµ
24 UÀÇ º» È¿¼Ò¿Í 0.5 §¶ÀÇ supercoiled pBR322 DNA¸¦ 37¡É, 24½Ã°£ ¹ÝÀÀÇÏ¿©µµ DNAÀÇ EtBr Á¸ÀçÇÏ¿¡¼­ Àü±â¿µµ¿ ÆÐÅÏ¿¡ º¯È­°¡ ÀϾÁö ¾Ê´Â´Ù.
¿ëµµ
- DNA conformationÀÇ º¯È¯°ú ÇØ¼®
»ç¿ë»óÀÇ ÁÖÀÇ
- ÷ºÎ¹ÝÀÀ¾×¿¡´Â spermidine (ÃÖÁ¾³óµµ 5 mM)ÀÌ Ã·°¡µÇ¾î ÀÖ´Ù. SpermidineÀ» ÷°¡ÇÏÁö ¾Ê´Â °æ¿ì Ȱ¼ºÀÌ 1/20Á¤µµ·Î ÀúÇÏÇÏ´Â ¼ö°¡ ÀÖ´Ù. Spermidine À» ÷°¡ÇÒ ¶§´Â HCI·Î pH8.0·Î Á¶Á¤ÇÏ¿© »ç¿ëÇÒ °Í.
- pBR322 DNA¿Í ¬æX174 DNAÀÇ RF I (supercoil ºÐÀÚ)À» DNA Topoisomerase IÀ¸·Î ¹ÝÀÀÇÑ ÈÄ, Àü±â¿µµ¿Çϸé gelÁß¿¡ EtBrÀÌ Æ÷ÇԵǾî ÀÖ´Â °æ¿ì ¹êµåÀÇ À§Ä¡¿¡ º¯È­°¡ ÀϾÁö ¾Ê´Â´Ù.
À̰ÍÀº DNA Topoisomerase I¿¡ ÀÇÇØ relaxed formÀ¸·Î º¯È¯ÇÑ DNA°¡ EtBrÀÇ ¿µÇâÀ¸·Î ´Ù½Ã supercoil »óÅ·Πº¯Çعö¸®±â ¶§¹®ÀÌ´Ù.
µû¶ó¼­ DNA Topoisomerase IȰ¼ºÀ» ÃøÁ¤ÇÒ ¶§´Â EtBrÀÌ Æ÷ÇÔµÇÁö ¾ÊÀº ¾Æ°¡·Î½º °Ö¿¡¼­ Àü±â¿µµ¿À» ½Ç½ÃÇÑ ´ÙÀ½ EtBr·Î ¿°»öÇÒ Çʿ䰡 ÀÖ´Ù.
- 10¡¿ ÷ºÎ ¹öÆÛ¿¡ 0.1% BSA¸¦ Á÷Á¢ ÷°¡ÇÏ¸é ´Ù·®ÀÇ ¹é»ö ħÀüÀÌ »ý±â¹Ç·Î ¹ÝÀÀ¾×À» Á¶Á¦ÇÒ ¶§´Â ´ÙÀ½ÀÇ ¼ø¼­·Î ÇÑ´Ù.
dH2O ¡æ 10¡¿ ÷ºÎ ¹öÆÛ ¡æ 0.1% BSA ¡æ ±âÁú DNA
- º» È¿¼Ò´Â À¯¸®³ª ÇÃ¶ó½ºÆ½¿¡ ´ëÇÏ¿© ÈíÂø¼ºÀÌ Å©¹Ç·Î ¹ÝÀÀÇÒ ¶§´Â BSA(Bovine Serum Albumin)À» ÷°¡ÇÏ´Â °ÍÀÌ ¹Ù¶÷Á÷ÇÏ´Ù.

Keyword :