´Ý±â
TaKaRa
Á¦Ç°¸í/Á¦Ç°ÄÚµå
Ű¿öµå°Ë»ö
°Ë»ö
´Ý±â
  • °í°´Áö¿ø¼¾ÅÍ 
  • ¾÷¹«¾È³»¦¢ÇмúÁö¿ø
  • ÀüÈ­¹øÈ£¦¢02-2081-2510
  • Email     ¦¢support@takara.co.kr
  • ´ëÀüÁö»ç 
  • ¾÷¹«¾È³»¦¢´ëÀü/ÃæÃ»Áö¿ª ÁÖ¹®, ÇмúÁö¿ø
  • ÀüÈ­¹øÈ£¦¢042-828-6525
  • Email     ¦¢tkbd@takara.co.kr
  • ¾÷¹«½Ã°£¾È³»
  • [ Æò¡¡¡¡ÀÏ ] 09 : 00 ~ 18 : 00 ¦¢ [ Á¡½É½Ã°£ ] 12 : 00 ~ 13 : 00
  • Å䡤ÀÏ¿äÀÏ, °øÈÞÀÏÀº ÈÞ¹«ÀÔ´Ï´Ù.

T4 RNA Ligase

-

Á¦Á¶»ç Á¦Ç°ÄÚµå Á¦Ç°¸í ¿ë·® °¡°Ý
(ºÎ°¡¼¼º°µµ)
ºñ°í »ç¿ëÀڸŴº¾ó
Takara
2050A
T4 RNA Ligase
°ü·ÃÇмú ±¸¸ÅÇϱâ
1,000 U
136,800¿ø 
171,000¿ø
°¡°ÝÇÒÀÎ
03.02 ~ 04.30
2050A_DS.v1901Da.pdf
Takara
2050B
T4 RNA Ligase
°ü·ÃÇмú ±¸¸ÅÇϱâ
5,000 U
769,500¿ø 

³óµµ 10~50 U/§¡
Çü»ó
20 mM Tris-HCl (pH7.5)
50 mM NaCl
5 mM 2-Mercaptoethanol
0.1 mM EDTA
50% Glycerol
º¸Á¸ -20¡É
÷ºÎ Buffer Á¶¼º(10¡¿)
500 mM Tris-HCl (pH7.5)
100 mM MgCl2
100 mM DTT
10 mM ATP
0.1% BSA [º°Ã·]*
* BSA°¡ ħÀüÇÒ ¿ì·Á°¡ ÀÖÀ¸¹Ç·Î µ¿°á¡¤À¶ÇØ´Â °¡´ÉÇÑ ÇÑ ÇÇÇØ ÁֽʽÿÀ.
±â¿ø
Escherichia coli B infected with T4 am N82
Á¦Ç°¼³¸í
º» È¿¼Ò´Â ATP¸¦ AMP¿Í PPi·Î ºÐÇØÇÏ¿© ±× ¿¡³ÊÁö·Î 5¡¯-P¸»´ÜÀÇ oligonucleotide¿Í 3¡¯-OH ¸»´ÜÀÇ oligonuceotide¸¦ °áÇÕ½ÃŰ´Â È¿¼ÒÀÌ´Ù.
ÃÖ¼Ò±âÁúÀº NpNpNOH(3¡¯-OH oligomer, ¼ö¿ëü), pNp(5¡¯, 3¡¯DP monomer °ø¿©Ã¼)ÀÌ´Ù. ¶óÀ̰ÔÀÌ¼Ç È¿À²Àº ¼ö¿ëü, °ø¿©Ã¼ °¢°¢ÀÇ ¿°±â¿¡ ¿µÇâÀ» ¹ÞÀ¸¸ç, ÀϹÝÀûÀ¸·Î ¼ö¿ëü¿¡´Â purineÀ», °ø¿©Ã¼´Â pyrimidineÀ» Æ÷ÇÔÇÏ´Â °ÍÀÌ È¿À²ÀÌ ÁÁ´Ù. DNA´Â RNAº¸´Ù »ó´çÈ÷ È¿À²ÀÌ ¶³¾îÁö°í, ±¸Á¶ÀûÀ¸·Î 3¡¯¸»´Ü¿¡ °¡±î¿î P ¸»´ÜÀ» °®´Â RNAµµ È¿À²ÀÌ ÁÁÁö ¾ÊÀ¸¸ç, 3¡¯- uridine oligomer ¶ÇÇÑ ¼ö¿ëü·Î½á ºÎÀû´çÇÏ´Ù. 3¡¯¼ö¿ëüÀÇ °æ¿ì´Â BAP󸮿¡ ÀÇÇÏ¿© È¿À²À» ³ôÀÏ ¼ö ÀÖ´Ù.
5¡¯, 3¡¯DP monomer °ø¿©Ã¼·Î½á´Â C £¾ U £¾ A £¾ GÀÇ ¼øÀ¸·Î ³ôÀº È¿À²À» °¡Áö°í ÀÖ´Ù.
Ȱ¼ºÀÇ Á¤ÀÇ
Oligo(A)nÀ» ±âÁú·Î ÇÏ¿© 5¡É, 10ºÐµ¿¾È 1 pmolÀÇ [5¡¯-32P]pCp¸¦ »êºÒ¿ë¼º ħÀü¹°·Î »ç¿ëÇÏ´Â °ÍÀ» È¿¼ÒȰ¼º 1 U·Î ÇÑ´Ù(RNA 3¡¯¸»´Ü Ç¥½Ä¹ÝÀÀ).
Ȱ¼ºÃøÁ¤¿ë ¹ÝÀÀ¾× Á¶¼º
50 mM HEPES-NaOH Buffer (pH7.5)
20 mM MgCl2
3.3 mM DTT
6 ¥ìM ATP
0.001% BSA
10% DMSO
1.2 ¥ìM 3¡¯- OH RNA
2.4 ¥ìM [5¡¯-32P]pCp
¼øµµ
- 100 UÀÇ º» È¿¼Ò¿Í 1 §¶ÀÇ ¥ëDNA-Hind III ºÐÇØ¹°À» 37¡É, 24½Ã°£ ¹ÝÀÀÇØµµ DNAÀÇ Àü±â¿µµ¿ ÆÐÅÏ¿¡ º¯È­°¡ ¾ø´Ù.
- 100 UÀÇ º» È¿¼Ò¿Í 1 §¶ÀÇ 16S¿Í 23S rRNA¸¦ 37¡É, 24½Ã°£ ¹ÝÀÀÇÏ¿©µµ RNAÀÇ Àü±â¿µµ¿ ÆÐÅÏ¿¡ º¯È­°¡ ¾ø´Ù.
- 20 UÀÇ º» È¿¼Ò¿Í 6 §¶ÀÇ ¥ëDNA-Hind III ºÐÇØ¹° ¶Ç´Â 6 §¶ÀÇ ¥ëDNA-Pst I ºÐÇØ¹°À» 37¡É, 24½Ã°£ ¹ÝÀÀÇÏ¿©µµ °¢ DNA´Â T4 DNA ligase¿¡ ÀÇÇØ 90%ÀÌ»ó ¿¬°áµÇ°í, ±×Áß 100%°¡ °¢°¢ Hind III ¶Ç´Â Pst I¿¡ ÀÇÇØ ÀçÀý´ÜµÈ´Ù.
»ç¿ë»óÀÇ ÁÖÀÇ
- 4¡É ÀÌÇÏ º¸Á¸¿¡¼­ ¾à 1³â°£ ¾ÈÁ¤ÇÏ´Ù.
- ºÐÀÚ°£ ¶óÀ̰ÔÀ̼ÇÀÇ ÃÖÀû¹ÝÀÀ ¿Âµµ´Â 5~15¡É·Î, ±× ÀÌ»ó ³ô¾ÆÁö¸é ¾ïÁ¦µÈ´Ù.
- PEG °øÁ¸ÇÏ¿¡¼­ ¹ÝÀÀÀº ÃËÁøµÇ³ª, ¹ÝÀÀƯÀ̼º¿¡´Â º¯È­°¡ ¾ø´Ù.
- ¿¬°á¹ÝÀÀÀÇ È¿À²À» ³ôÀ̱â À§Çؼ­´Â È¿¼Ò³óµµ´Â ³ô°í ATP ³óµµ´Â ±âÁú³óµµ¸¦ °í·ÁÇÏ¿© °¡´ÉÇÑ ³·°Ô ÇÏ´Â °ÍÀÌ ÁÁ´Ù.
- 10¡¿ ÷ºÎ ¹öÆÛ¿¡ 0.1% BSA¸¦ Á÷Á¢ ÷°¡ÇÏ¸é ´Ù·®ÀÇ ¹é»öħÀüÀÌ »ý±â¹Ç·Î ¹ÝÀÀ¾×À» Á¶Á¦ÇÒ ¶§´Â ´ÙÀ½ÀÇ ¼ø¼­·Î ½Ã¾àÀ» ÷°¡ÇÑ´Ù.
dH2O ¡æ 10¡¿ ÷ºÎ ¹öÆÛ ¡æ 0.1% BSA ¡æ ±âÁú RNA ¶Ç´Â DNA
¿ëµµ
- ´ÜÀϰ¡´Ú RNA¿Í ´ÜÀϰ¡´Ú DNAÀÇ 3¡¯-OH ¸»´ÜÀÇ Ç¥½Ä
- ´ÜÀϰ¡´Ú oligo RNA, ´ÜÀϰ¡´Ú DNAÀÇ ÇÕ¼º
- ¿ÏÀüÇÑ ±æÀÌÀÇ cDNA ÇÕ¼º
Âü°í
Yeast tRNAphe¸¦ ±âÁú·Î ÇÏ¿´À» ¶§, »ó±â ¹ÝÀÀ¾× Áß¿¡ 50 UÀÇ º» È¿¼Ò¸¦ 5¡É, 16½Ã°£ ó¸®Çϸé 80% ÀÌ»ó tRNApheÀÇ 3¡¯¸»´ÜÀÌ Ç¥½ÄµÈ´Ù.

Keyword :

¼ö½ÄÈ¿¼Ò£¯Ligase
>
Cloning¿ë ligase
T4 DNA Ligase