´Ý±â
TaKaRa
Á¦Ç°¸í/Á¦Ç°ÄÚµå
Å°¿öµå°Ë»ö
°Ë»ö
´Ý±â
  • °í°´Áö¿ø 
  • ¾÷¹«¾È³»¦¢Á¦Ç°¹®ÀÇ
  • ÀüÈ­¹øÈ£¦¢02-2081-2510
  • Email     ¦¢support@takara.co.kr
  • ´ëÀüÁö»ç 
  • ¾÷¹«¾È³»¦¢´ëÀü/ÃæûÁö¿ª ÁÖ¹®, Á¦Ç°¹®ÀÇ
  • ÀüÈ­¹øÈ£¦¢042-828-6525
  • Email     ¦¢tkbd@takara.co.kr
  • ¾÷¹«½Ã°£¾È³»
  • [ Æò¡¡¡¡ÀÏ ] 09 : 00 ~ 18 : 00 ¦¢ [ Á¡½É½Ã°£ ] 12 : 00 ~ 13 : 00
  • Å䡤ÀÏ¿äÀÏ, °øÈÞÀÏÀº ÈÞ¹«ÀÔ´Ï´Ù.
Cloned

E. coli DNA Ligase

-

Á¦Á¶»ç Á¦Ç°ÄÚµå Á¦Ç°¸í ¿ë·® °¡°Ý
(ºÎ°¡¼¼º°µµ)
ºñ°í »ç¿ëÀڸŴº¾ó
Takara
2160A
E. coli DNA Ligase
°ü·ÃÇмú ±¸¸ÅÇϱâ
1,000 U
101,000¿ø  2160A_DSv2107Da.pdf
Takara
2160B
E. coli DNA Ligase
°ü·ÃÇмú ±¸¸ÅÇϱâ
5,000 U (2160A x 5)
455,000¿ø 

Á¦Ç°¼³¸í
º» È¿¼Ò´Â ÀÎÁ¢ÇÑ 2Áß °¡´Ú DNAÀÇ 5'-P¸»´Ü°ú 3'-OH¸»´ÜÀ» phosphodiester °áÇÕÀ¸·Î ¿¬°áÇÏ´Â È¿¼Ò·Î º¸Á¶ÀÎÀڷμ­ NAD¸¦ ÇÊ¿ä·Î ÇÑ´Ù. º» È¿¼Ò´Â µ¹Ã⸻´Ü(cohesive end)³¢¸®ÀÇ ¿¬°á¹ÝÀÀ¸¸ °¡´ÉÇϳª, PEG¿Í °í³óµµÀÇ 1°¡ ¾çÀÌ¿ÂÀÇ Á¸Àç ÇÏ¿¡¼­´Â ÆòÈ°¸»´Ü(blunt end)À» ¿¬°áÇÏ´Â ¹ÝÀÀµµ °¡´ÉÇÏ´Ù. DNAÀÇ 5¡¯-P ¸»´Ü°ú RNAÀÇ 3¡¯-OH ¸»´Ü, ±×¸®°í RNA³¢¸®ÀÇ ¿¬°áÀº ºÒ°¡´ÉÇÏ´Ù.
º¸Á¸
-20 ¡É
³óµµ
60 U/§¡
Çü»ó

10 mM

Potassium Phosphate (pH7.5)

50 mM

KCl

1 mM

DTT

1 mM

EDTA

50%

Glycerol

ÁÖÀÇ
º» Á¦Ç°¿¡´Â reaction buffer°¡ Æ÷ÇԵǾî ÀÖÁö ¾Ê´Ù.
È°¼ºÀÇ Á¤ÀÇ
6 §¶/20 §¡ÀÇ ¥ëDNA-HindIII ºÐÇع°À» 16¡É, 30ºÐ µ¿¾È¿¡ 90%ÀÌ»ó ligation ½ÃÅ°´Â È¿¼Ò È°¼ºÀ» 1 U·Î ÇÑ´Ù.
È°¼º ÃøÁ¤¿ë ¹ÝÀÀ¾× Á¶¼º

30 mM

Tris-HCl (pH8.0)

4 mM

MgCl2

10 mM

(NH4)2SO4

1.2 mM

EDTA

100 ¥ìM

NAD

0.005%

BSA

6 §¶/20 §¡

¥ëDNA-Hind III ºÐÇع°

¼øµµ
-360 UÀÇ º» È¿¼Ò¿Í 1 §¶ÀÇ ¥ëDNA-HindIII ºÐÇع°À» 37¡É, 16½Ã°£ ¹ÝÀÀÇصµ DNAÀÇ Àü±â¿µµ¿ ÆÐÅÏ¿¡´Â º¯È­°¡ ÀϾÁö ¾Ê´Â´Ù.
-360 UÀÇ º» È¿¼Ò¿Í 1 §¶ÀÇ closed circular (RF I) pBR322 DNAÀ» 37¡É, 16½Ã°£ ¹ÝÀÀÇصµ DNAÀÇ Àü±â¿µµ¿ ÆÐÅÏ¿¡´Â º¯È­°¡ ÀϾÁö ¾Ê´Â´Ù.
-360 UÀÇ º» È¿¼Ò¿Í 1 §¶ÀÇ 16S¹× 23S rRNA¸¦ 37¡É, 1½Ã°£ ¹ÝÀÀÇصµ RNAÀÇ Àü±â¿µµ¿ ÆÐÅÏ¿¡´Â º¯È­°¡ ÀϾÁö ¾Ê´Â´Ù.
»ç¿ë»óÀÇ ÁÖÀÇ
º» È¿¼Ò´Â °ú¹ßÇö ´ëÀå±ÕÁַκÎÅÍ Á¤Á¦ÇÏ¿© ºÒ¼ø¹°À» °ÅÀÇ Æ÷ÇÔÇÏÁö ¾Ê´Â °í¼øµµÀÇ Á¦Ç°ÀÌ´Ù. µû¶ó¼­ °í³óµµÀÌÁö¸¸ °ú·®À» »ç¿ëÇصµ ¹®Á¦°¡ ¾ø´Ù.
¿ëµµ
Okayama-Berg¹ý°ú Gubler-Hoffman¹ýÀ¸·Î cDNA¸¦ ÇÕ¼ºÇÒ ¶§ second strand cDNA ÇÕ¼º (Okayama-Berg¹ý¿¡¼­ÀÇ »ç¿ë·®Àº ¾à 50 U, Gubler-Hoffman¹ý¿¡¼­ÀÇ »ç¿ë·®Àº ¾à 1.5 U)
±â¿ø
Escherichia coli UT 481 carrying the plasmid encoding the ligase
ÀϹÝÀû ¼ºÁú
-ºÐÀÚ·®, ¾à 77,000
-¼Ò´ÜÀ§, single polypeptide
-ÃÖÀû pH
pH7.5~8.0(Tris-HCl¿ÏÃæ ¿ë¾×)
pH8.0(ÀÎ»ê ¿ÏÃæ¾×)
-º¸Á¶ÀÎÀÚ, NAD
-È°¼ºÈ­Á¦
2°¡ ¾çÀÌ¿Â: Mg2+(1~3 mM), Mn 2+ (2~10 mM) °í³óµµ¿¡¼­´Â ÀúÇØ
1°¡ ¾çÀÌ¿Â: NH4+, K+, Rb+, Cs+, Li+
°ü·ÃÁ¦Ç°
T4 DNA Ligase¿Í E. coli DNA Ligase Ư¼º ºñ±³

 

T4 DNA Ligase

E. coli DNA Ligase

ºÐÀÚ·®

¾à 62,000

¾à 77,000

ÃÖÀû pH

7.2~7.8

7.5~8.0

Á¶È¿¼Ò (coenzyme)

ATP

NAD

ȯ¿øÁ¦

ÇÊ¿ä

ºÒÇÊ¿ä

ÆòÈ°¸»´ÜÀÇ ¿¬°á

°¡´É

ºÒ°¡´É (+PEG·Î °¡´É)

µ¹Ã⸻´ÜÀÇ ¿¬°á

°¡´É

°¡´É


Keyword :

¼ö½ÄÈ¿¼Ò£¯Ligase
>
Cloning¿ë ligase
T4 DNA Ligase