제품설명
본 제품은 Streptomyces rochei DB-34의 액체 배양 상등액에서 제조된 β-1,6-glucanase, β-1,3-glucanase활성을 주로 가지는 효모의 세포벽을 용해하는 복합효소제이다. 본 제품을 이용할 경우 Saccharomyces cerevisiae 등의 자낭균 효모뿐만 아니라 기존의 Zymolyase 처리로는 충분하게 protoplast화 되지 않았던 분열효모 Schizosaccharomyces pombe와 protoplast화가 거의 불가능했던 Ustilago maydis, Phaffia rhodozyma, Cryptococcus albidus 등의 담자균 효모 및 불완전 효모 등에서도 고효율로 protoplast를 제작할 수 있다.
보존 4℃, 건조상태
형상 동결건조 분말 (부형제로 celite를 포함)
기원
Streptomyces rochei DB-34
활성의 정의
- β-1,6-glucanase 활성:
37℃, pH6.0의 10 ㎎/㎖ Pustulan 용액에서 1분간 1 μmol의 환원당을 유리하는 효소량을 1 U으로 한다.
- 세포벽 용해 활성:
Cryptococcus albidus IFO 0612의 세포벽을 기질로 30℃, pH6.0의 조건에서 1분간 반응하여 660 nm 흡광도를 1% 감소시키는 활성을 1 U으로 한다
사용방법
McIlvain Buffer (0.1 M Citric acid 용액, 0.2 M Sodium Phosphate 용액을 약 36.8 : 63.2로 혼합한 pH6.0의 buffer)에 적당량으로 녹인 후 사용 전에 Cellulose Acetate 필터로 사용 전에 여과하여 사용한다
일반적 성질
- 최적 pH: 6.0
- 안정적인 pH 구간: 4~9
- 최적 반응 온도:30~50℃
- 온도 안정성: 50℃ 이하
용도
다양한 효모의 protoplast 제작
사용상의 주의
(1) 본 제품을 사용한 protoplast 제작에서 삼투안정제는 sodium tartrate를 사용해야 합니다. Sorbitol을 사용하는 경우 충분한 protoplast가 형성되지 않습니다.
(2) Protoplast 형성을 위해 exponential phase의 효모를 사용하는 것을 권장하며, stationary phase의 경우 protoplast의 효율이 감소할 수 있습니다.
(3) Protoplast 세포벽의 regeneration에는 1.0~1.5 M의 sorbitol을 삼투 안정제로 추천합니다.
